大豆WRKY、Exo70及其相關基因在抗旱性與生長發(fā)育中的功能.pdf

1、大量的研究表明WRKY及VQ互作蛋白在植物抗病抗逆響應中發(fā)揮重要作用，但在大豆中尚無系統(tǒng)性的分析研究。為了研究大豆WRKY及VQ蛋白在大豆抗旱性中的功能，本研究通過定量PCR系統(tǒng)分析了大豆WRKY與VQ基因在干旱及ABA處理之后的表達變化，從中鑒定得到一批對干旱及ABA響應的大豆WRKY與VQ基因，并對其中的VQ34、VQ58及WRKY56這三個基因進行了更進一步的功能分析。酵母雙雜交表明大豆VQ34與VQ58能同兩個WRKY亞家族的成

2、員特異性互作，說明它們可能通過影響WRKY轉錄因子在植物中發(fā)揮功能。氨基酸序列分析發(fā)現大豆WRKY56與擬南芥WRKY51高度相似，在高度保守的WRKY功能域也有共同的氨基酸變異。為了直接研究這兩個WRKY基因的功能，我們已經通過農桿菌轉化技術獲取了擬南芥超表達轉基因植株并對它們的抗旱性進行了初步的分析。本研究也獲得了少量超表達的大豆轉基因植株，為今后進一步研究打下了基礎。
　　本研究在對大豆WRKY家族分析過程中，發(fā)現其中一個成

3、員不但含有一個變異的WRKY功能域，還帶有一個特異的跨膜(TM)域。這個大豆WRKY相關蛋白(GmWRP1)沒有DNA結合活性，通過綠色熒光蛋白(GFP)融合表明GmWRP1并不在細胞核中，而是定位于高爾基體上。對大豆及其它植物蛋白組的系統(tǒng)分析發(fā)現該跨膜域還同一些胞外分泌復合體Exo70亞基蛋白結合，從而形成一個豆科植物特有的Exo70亞家族。熒光顯微觀察發(fā)現這些Exo70蛋白同樣也定位在高爾基體上。Gm WRP1在植物的根、花、莢和種