一例pH實時監(jiān)控?zé)晒馓结樤O(shè)計及作用機制研究.pdf

1、細(xì)胞內(nèi)pH值在調(diào)節(jié)各種生理活動中發(fā)揮著重要的作用，因此，實時監(jiān)控pH值的變化具有重要意義。相比于傳統(tǒng)檢測方法，熒光檢測具有操作簡單、靈敏度高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點，加之現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)的發(fā)展和各種先進(jìn)的熒光檢測技術(shù)及儀器，熒光探針技術(shù)日益成為熒光成像、基因診斷、醫(yī)療診斷等領(lǐng)域非常重要的研究手段。
　　溶酶體是細(xì)胞中一種酸性亞細(xì)胞器，其pH的變化與溶酶體的功能息息相關(guān)。微環(huán)境的酸度與腫瘤的生長、入侵和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，因此，對溶酶體和腫瘤

2、組織成像并且監(jiān)控其pH變化具有重要意義。本文設(shè)計合成了一例可用于實時監(jiān)控活體pH變化的熒光探針RA，該探針在pH4.25和7.20之間具有很好的可逆循環(huán)性，不僅能定位溶酶體，實時監(jiān)控青蒿琥酯(ART)、氯喹(CQ)以及地塞米松(DEX)誘導(dǎo)過程中細(xì)胞溶酶體pH的變化。該探針還能對卵巢癌腫瘤成像，證明了腫瘤組織的酸性環(huán)境，同時根據(jù)該探針在癌細(xì)胞和正常細(xì)胞中熒光強度的不同，推測其可以用于區(qū)分正常細(xì)胞和癌細(xì)胞，為癌癥的檢測和治療提供重要的信息

3、。
　　對于氯喹和地塞米松誘導(dǎo)溶酶體pH變化的研究有很多，而關(guān)于青蒿琥酯對細(xì)胞溶酶體作用的報道很少。本文設(shè)計合成了三例染料E、B、N，分別用于標(biāo)記ART得到AE、AB、AN。通過4種測試手段對AE、AB、AN進(jìn)行比較:首先，AE、AB、AN與E、B、N的光譜性質(zhì)基本沒有差異，隨后通過與Lyso Tracker Red進(jìn)行細(xì)胞復(fù)染實驗，用熒光的手段證明了ART聚集在細(xì)胞溶酶體內(nèi)。酶水解測試說明AE與AB容易發(fā)生水解，而AN基本不被分