CD4+LAP+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在急性冠脈綜合征患者外周血中受損及其機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分CD4+LAP+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在ACS患者中數(shù)目減少和功能降低
　　目的：CD4+latency-associatedpeptide(LAP)+調(diào)節(jié)性T(Treg)細(xì)胞是新發(fā)現(xiàn)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群,然而該細(xì)胞在急性冠脈綜合征(ACS)患者中的特點(diǎn)并未曾研究過,因此,本實(shí)驗的目的是檢測這類新型CD4+LAP+Treg細(xì)胞的數(shù)量和功能在ACS患者外周血中是否受損。
　　方法：64例ACS患者包括[38例不穩(wěn)定性心絞痛(UA)

2、和26例急性心肌梗死(AMI)]和70對照患者包括[28例慢性穩(wěn)定性心絞痛(CSA)和42例胸痛綜合征(CPS)]。分別留取患者的外周血,密度梯度離心法分離外周血單核細(xì)胞并用流式抗體標(biāo)記,流式細(xì)胞儀檢測CD4+LAP+Treg細(xì)胞亞群的數(shù)目,細(xì)胞閃爍計數(shù)儀檢測腺苷的吸收率來檢測CD4+LAP+Treg細(xì)胞的功能。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測CD4+LAP+Treg細(xì)胞和效應(yīng)T(CD4+LAP-CD25int/lowTcell)共培

3、養(yǎng)上清細(xì)胞因子TNF-α的含量.
　　結(jié)果：外周血中ACS患者(UA和AMI)CD4+LAP+Treg/CD4+T細(xì)胞的比例(0.64±0.32％)與對照病例組[CSA(1.2±0.51%)和CPS(1.42±1.09%)]相比比例明顯下調(diào),ACS患者組與對照病例組之間相比有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異(p<0.001),而對照組CSA(1.2±0.51%)和CPS(1.42±1.09%)之間沒有顯著性差異(p=0.24),同樣在AMI組(0

4、.62±0.32%)和UA組(0.65±0.33%)也沒有明顯的差異(p=0.77).而且ACS患者的CD4+LAP+Treg細(xì)胞抑制效應(yīng)T(CD4+LAP-CD25int/lowTcell)細(xì)胞增殖及分泌細(xì)胞因子(TNF-α)的功能也降低。
　　結(jié)論：一種新型調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群,定義為CD4+LAP+T細(xì)胞在ACS患者中受損
　　第二部分潛在相關(guān)肽LAP的受體GARP在ACS患者中下調(diào)
　　目的：最新研究發(fā)現(xiàn),“以糖蛋

5、白A為主的重復(fù)序列的孤獨(dú)TOLL樣受體(英文全稱GARP或LRRC32)”是LAP的受體,我們第一部分的研究表明,CD4+LAP+Treg細(xì)胞在ACS患者中受損,本實(shí)驗的目的是檢測CD4+LAP+Treg細(xì)胞的表面標(biāo)記LAP的受體GARP在ACS患者中是否改變。
　　方法：47例ACS患者包括(24例UA和23例AMI)和47對照患者包括(22例CSA和25例CPS),留取外周血標(biāo)本,密度梯度離心法分離獲取淋巴細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測

6、CD4+GARP+T細(xì)胞以及CD4+LAP+GARP+T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例。實(shí)時定量PCR檢測了外周血PBMCsGARP的拷貝數(shù)。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測了患者血清中的細(xì)胞因子TGF-β和IL-10的水平。
　　結(jié)果：ACS患者外周血中的CD4+GARP+T細(xì)胞和CD4+LAP+GARP+T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例比對照患者明顯降低,GARP在外周血中PBMCs中mRNA的表達(dá)也降低。外周血清中細(xì)胞因子TGF-