人血漿中環(huán)酯紅霉素和單硝酸異山梨酯定量分析方法研究和應用.pdf

1、目的:建立兩種靈敏、專屬、快速的液相色譜-串聯(lián)質譜定量分析方法,分別測定血漿中環(huán)酯紅霉素和單硝酸異山梨酯的濃度,用于兩者的臨床藥代動力學研究。
　　 方法:測定人血漿中環(huán)酯紅霉素濃度時,50μL血漿樣品經正己烷-二氯甲烷-異丙醇(20:10:1,v/v/v)液-液萃取后,以甲醇-5 mmol·L-1醋酸銨-甲酸溶液(75:25:0.2,v/v/v)為流動相,Capcell Pak C18 MG(35 mm×2.0 mm,3μm)

2、柱分離。采用API4000型三重四極桿串聯(lián)質譜儀電噴霧電離源,以多反應監(jiān)測(MRM)方式進行正離子檢測。用于定量分析的離子反應分別為m/z761→m/z158(環(huán)酯紅霉素)和m/z838→m/z158(內標,羅紅霉素)。
　　 測定人血漿中單硝酸異山梨酯濃度時,200μL血漿樣品經300μL乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-水-2 mmol·L-1甲酸銨溶液(40.50:10,v/v/v)為流動相,采用ZorbaxEclipse XDB-

3、C8(150 mm×4.6 mm,5μm)柱分離。采用API4000型三重四極桿串聯(lián)質譜儀電噴霧電離源,以多反應監(jiān)測(MRM)方式進行正離子檢測。用于定量分析的離子反應分別為m/z236→m/z45(單硝酸異山梨酯)和m/z296→m/z269(內標,氫氯噻嗪)。
　　 結果:測定血漿中環(huán)酯紅霉素的線性范圍為1.00～2000 ng·mL-1,可測定受試者口服500 mg環(huán)酯紅霉素至48 h的血漿藥物濃度；每個樣品測試時間為2.

4、5 min。測定血漿中單硝酸異山梨酯的線性范圍為5.00～1500 ng·mL-1,可測定受試者受試者單次及多次口服60 mg單硝酸異山梨酯至36 h的血漿藥物濃度；每個樣品測試時間為4.5min。
　　 結論:本文建立的測定人血漿中環(huán)酯紅霉素的液相色譜.串聯(lián)質譜法比文獻報道的方法的靈敏度提高了20倍,能跟蹤低劑量時的完整藥時曲線,成功應用于環(huán)酯紅霉素片的藥代動力學研究；建立的測定人血漿中單硝酸異山梨酯的液相色譜.串聯(lián)質諧法首次