三氧化二砷—泊洛沙姆407緩釋劑瘤內(nèi)注射治療裸鼠人肝癌移植瘤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、肝癌惡性程度高，預(yù)后差，是一種威脅人類(lèi)健康的惡性腫瘤，嚴(yán)重影響著人們的生存健康，早期手術(shù)是最佳治療方案，但獲此良機(jī)者甚少，中晚期原發(fā)性肝癌患者未經(jīng)治療，其自然生存期為1～4個(gè)月。因而尋求安全可靠的非手術(shù)療法、研究開(kāi)發(fā)高效抗腫瘤藥物，幫助中晚期肝癌患者延長(zhǎng)生命、提高生存質(zhì)量，顯得尤為重要，也是腫瘤研究工作者不斷的奮斗目標(biāo)。經(jīng)過(guò)不懈的研究，無(wú)論在藥物運(yùn)用方面，還是給藥方式方面都取得了重大進(jìn)展。肝癌介入治療。現(xiàn)已發(fā)展成為國(guó)內(nèi)外公認(rèn)是治療中晚期

2、肝癌的首選方法，方法包括經(jīng)導(dǎo)管肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)（TACE）、經(jīng)皮膚肝瘤體內(nèi)注射、激光高溫治療、冷凍治療、放射性同位素介入和中藥介入治療等。近年經(jīng)皮瘤體內(nèi)注射中藥也取得較好的療效，主要是有毒類(lèi)中藥，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)有良好的抗腫瘤作用，如去甲斑蝥素、三氧化二砷等。
　　三氧化二砷（As2○3）是中藥砒霜的主要有效成分，其注射液最早用于治療急性早幼粒細(xì)胞白血病，又?jǐn)U大到實(shí)體瘤肝癌的治療上，實(shí)驗(yàn)和臨床證實(shí)，其抗肝癌療效確定。但As2○3抗

3、腫瘤作用具有濃度、時(shí)間依賴關(guān)系，在一定范圍內(nèi)藥物濃度越高，用藥時(shí)間越長(zhǎng)，抗腫瘤效果越好，由于其治療劑量與中毒劑量接近，較大劑量使用時(shí)毒性亦較大，副作用增大。合成低濃度As2○3緩釋劑型瘤內(nèi)注射，既可使其具有良好的靶向性，使局部藥物濃度增加、作用時(shí)間延長(zhǎng)提高治療效果，又可減輕全身副作用。泊洛沙姆407（P407）是高分子非離子型表面活性劑，是一種溫敏型原位凝膠，毒性低，刺激性小，生物相容性好，是一種較理想的新型藥物控釋載體，可作為抗癌藥物

4、載體肝癌內(nèi)注射，延緩藥物釋放而提高抗癌療效。本實(shí)驗(yàn)建立裸鼠皮下人肝癌移植瘤模型，將P407作為藥物控釋載體，與As2O3制成As2O3-P407緩釋制劑，進(jìn)行瘤體注射，并與As2O3常規(guī)劑型對(duì)比，比較抑瘤療效，探討緩釋劑是否達(dá)到低濃度抗腫瘤，副作用小的目的。
　　本實(shí)驗(yàn)用人肝癌HepG2細(xì)胞為來(lái)源建立裸鼠皮下移植瘤模型，當(dāng)荷瘤裸鼠移植瘤最大直徑達(dá)到約0.5cm時(shí)，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組和空白對(duì)照組3組，每組8只，實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)

5、照組分別瘤內(nèi)中心單點(diǎn)注射As2O3-P407緩釋劑、As2O3普通注射劑，按純As2O32mg/kg（根據(jù)臨床常用劑量10mg/d折算成裸鼠劑量）給藥，約0.03-0.04ml/只，空白對(duì)照組注射等體積生理鹽水（NS）。1次/4天，4次為一療程，共給藥一療程。觀察用藥前體重與用藥后體重；測(cè)量治療前、后腫瘤大??；計(jì)算瘤重抑制率；各組裸鼠腫瘤組織做相應(yīng)病理切片，分別行HE染色、TUNEL法檢測(cè)、透射電鏡觀察，了解腫瘤細(xì)胞凋亡情況。并取每只裸

6、鼠后肢股骨骨髓涂片常規(guī)染色觀察骨髓抑制情況。觀察治療后裸鼠存活情況、精神狀態(tài)、活動(dòng)狀況、對(duì)刺激的反應(yīng)、體質(zhì)量下降幅度、食欲和尿、便等指標(biāo)，評(píng)價(jià)裸鼠生存質(zhì)量和藥物毒副反應(yīng)。
　　本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果如下：
　　As2O3-P407緩釋劑治療組腫瘤生長(zhǎng)受到顯著抑制，腫瘤體積與As2O3組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組最后瘤重分別為：0.3±0.08g、0.6±0.2g，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)，并且兩組與NS組瘤重(

7、1.1±0.1)相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)，兩組抑瘤率分別為：72％、46％。治療后As2O3-P407組裸鼠體重大于As2O3組和NS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。腫瘤組織經(jīng)HE染色、TUNEL法檢測(cè)、透射電鏡觀察，均顯示As2O3-P407緩釋劑治療組腫瘤細(xì)胞凋亡率高于As2O3組，骨髓圖片顯示無(wú)骨髓抑制現(xiàn)象。三組裸鼠均成活。實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組裸鼠精神狀態(tài)良好、活躍、對(duì)刺激的反應(yīng)靈敏、食欲好，大便成形；NS組裸鼠