HIF-1α在肝癌中的作用、HBx影響HIF-1通路以及HBx介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文HIF1α在肝癌中的作用、HBx影響HIF1通路以及HBx介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究姓名：王海平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：普外科指導(dǎo)教師：陳孝平2002.5.1堂!至蘭壟!：蘭!!堡墾蘭墮————j旦圭蘭!!!i墨3HIF1。顯著影響正常肝、肝硬化及肝癌組織中VEGF的表達(dá)。二、缺氧誘導(dǎo)因子1n(1IIF1o)裸基因注射促進(jìn)HepG2來源的異種移植肝癌的生長(zhǎng)和可能轉(zhuǎn)移(新生血管的生成、糖酵解是腫瘤惡性程度的

2、體現(xiàn)。HIF一1a在其中起著非常重要的作用，它通過反式激活VEGF、FII1、EPO、糖酵解酶等基因的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)腫瘤的血管生成和無氧代謝，薺與腫瘤的生長(zhǎng)、侵潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有關(guān)。歲目的：探討HIF1a對(duì)腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移的影響。／方法：本實(shí)驗(yàn)用HepG2細(xì)胞系建立了一個(gè)裸鼠的皮下肝癌模型，通過HIF1o裸基因直接注入瘤體，觀察HIF一1a對(duì)腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的影響。結(jié)果：1HepG2細(xì)胞形成實(shí)體性腫瘤后HIF1a和VEGF過度表達(dá)(PO05)；2HIF1

3、a促進(jìn)了HepG2來源的細(xì)胞的生長(zhǎng)，并且出現(xiàn)了一個(gè)攜帶外源注射基因FLAG的轉(zhuǎn)移灶；3實(shí)驗(yàn)組裸基因注射后和轉(zhuǎn)移灶中HIF1q和VEGF表達(dá)明顯增強(qiáng)(PO05)而且相關(guān)(Fo912)。夕結(jié)論：研究表明HIF1a表達(dá)反映著腫瘤對(duì)缺氧的適應(yīng)，在腫瘤生長(zhǎng)中是一陽性因素并可能參與了腫瘤的轉(zhuǎn)移。三、HBx通過激活缺氧誘導(dǎo)因子1(IIIF1)通路促進(jìn)VEGF的表達(dá)／乙肝病毒x蛋白(HepatitisBVirusxprotein，HBx)是乙肝病毒導(dǎo)致

4、肝癌發(fā)生的主要因素。作為一種多功能的蛋白質(zhì)，它作用于細(xì)胞內(nèi)多種通路，影響細(xì)胞的凋亡、生長(zhǎng)的分化，同時(shí)也能上調(diào)VEGF的表達(dá)。HIF1Q是HIF一1異物、二聚體的功能成分，也是VEGF的反式激活因子。哆目的；探討ILBx蛋白是否通過激活HIF1通路來影響VEGF的表達(dá)。r方法：本研究對(duì)兩個(gè)質(zhì)粒pIRES—EGFP／IBx和TKHyg進(jìn)行共轉(zhuǎn)染入肝癌細(xì)胞系SMMC7721，篩選出熒光陽性和熒光陰性的抗性克隆。通過PCR和RT—PCR對(duì)這兩種