曲美他嗪對(duì)急性胰腺炎大鼠HIF-1α-iNOS-NO信號(hào)通路及HIF-1α-VEGF信號(hào)通路的作用.pdf

1、目的：研究曲美他嗪對(duì)曲美他嗪對(duì)急性胰腺炎大鼠HIF-1α-iNOS-NO信號(hào)通路及HIF-1α-VEGF信號(hào)通路的作用。
　　方法：清潔級(jí)健康雄性SD大鼠54只（體重240g-260g），適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為三組：對(duì)照組（A組，n=18只）；AP模型組（B組， n=18只）；曲美他嗪干預(yù)組（C組，n=18只）。對(duì)照組大鼠開腹后僅翻動(dòng)腸管；采用膽胰管逆行注射4％牛磺膽酸鈉溶液（1ml/kg，0.2 mL/min）建AP模型；于A

2、P制模蘇醒后予曲美他嗪（5mg/kg，溶于生理鹽水）灌胃，建立曲美他嗪干預(yù)組。每組于制模后按6h、12h、24h分成3個(gè)亞組，于上述時(shí)間點(diǎn)處死大鼠取靜脈血、胰腺組織，每時(shí)點(diǎn)取大鼠6只。以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)血清中IL-6的濃度；比色法測(cè)定血清中淀粉酶及NO濃度；免疫組化法檢測(cè)胰腺組織中VEGF和iNOS含量；Western blot法檢測(cè)胰腺組織中HIF-1α含量；取胰腺組織，10%甲醛固定，制成石蠟切片，用于HE染色，光鏡

3、下觀察胰腺病理損傷情況。
　　結(jié)果：
　　1.血清淀粉酶水平：對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)血清淀粉酶升高不明顯；模型組大鼠血清淀粉酶自制模后逐漸升高；曲美他嗪干預(yù)組大鼠血清淀粉酶在6h、12h、24h呈逐漸下降趨勢(shì)。與對(duì)照組相比較，模型組各時(shí)間點(diǎn)大鼠血清淀粉酶水平均顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，曲美他嗪干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)大鼠血清淀粉酶水平顯著降低（P＜0.05）。
　　2.血清IL-6水平：對(duì)照組大鼠血清IL-6各時(shí)間點(diǎn)無顯著

4、差異。模型組各時(shí)間點(diǎn)血清IL-6水平較對(duì)照組均有明顯升高（P＜0.05）；曲美他嗪治療組與模型組相比，各時(shí)間點(diǎn)血清IL-6水平有所降低（P＜0.05）；模型組各時(shí)間點(diǎn)血清IL-6水平呈逐漸上升趨勢(shì)（P＜0.05）；曲美他嗪治療組各時(shí)間點(diǎn)血清IL-6水平呈逐漸下降趨勢(shì)（P＜0.05）。
　　3.血清NO水平：對(duì)照組大鼠血清NO各時(shí)間點(diǎn)無顯著差異。模型組各時(shí)間點(diǎn)血清NO水平較對(duì)照組均有明顯升高（P＜0.05）；曲美他嗪治療組與模型組相

5、比，各時(shí)間點(diǎn)血清NO水平有所降低（P＜0.05）；模型組各時(shí)間點(diǎn)血清NO水平呈逐漸上升趨勢(shì)（P＜0.05）；曲美他嗪治療組各時(shí)間點(diǎn)血清NO水平呈逐漸下降趨勢(shì)（P＜0.05）。
　　4.HIF-1α的表達(dá)水平：對(duì)照組大鼠胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平各時(shí)間點(diǎn)無顯著差異。模型組各時(shí)間點(diǎn)胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平較對(duì)照組均有明顯升高（P＜0.05）；曲美他嗪治療組與模型組相比，各時(shí)間點(diǎn)胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平有所降低（P＜0.05）

6、；模型組各時(shí)間點(diǎn)胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平呈逐漸上升趨勢(shì)（P＜0.05）；曲美他嗪治療組各時(shí)間點(diǎn)胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平呈逐漸下降趨勢(shì)（P＜0.05）。
　　5.大鼠胰腺大體標(biāo)本觀察：對(duì)照組：肉眼觀胰腺無明顯水腫、壞死或出血表現(xiàn)，腹腔無積液。光鏡下胰腺小葉界限明確，腺泡結(jié)構(gòu)完整，間質(zhì)未見水腫，有少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，且各時(shí)間點(diǎn)無明顯差別。
　　模型組：肉眼觀可見胰腺組織水腫，少量胰腺腺葉壞死，腹腔可見少量血性積液。胰腺壞死

7、面積隨著制模時(shí)間延長(zhǎng)逐漸擴(kuò)大，出血灶、鈣化斑及血性腹腔積液量隨時(shí)間延長(zhǎng)增加。6h組光鏡下可見少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)少量出血，部分胰腺腺泡細(xì)胞壞死；12h組光鏡下可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)出血，腺泡細(xì)胞壞死較前加重；24h組光鏡下可見大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)出血增多，胰腺腺泡細(xì)胞壞死，胰腺小葉結(jié)構(gòu)破壞，大片胰腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞壞死。
　　曲美他嗪干預(yù)組：肉眼觀可見胰腺組織充血水腫，無明顯出血、壞死表現(xiàn)，腹腔無積液。光鏡下胰腺間質(zhì)明顯水腫,少量炎癥

8、細(xì)胞浸潤(rùn)及極少量腺泡細(xì)胞壞死，且各時(shí)間點(diǎn)無明顯差別。
　　6.大鼠胰腺組織病理學(xué)評(píng)分結(jié)果：按照Schmidt’s方法進(jìn)行評(píng)分，對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)大鼠胰腺病理損傷評(píng)分變化不明顯；模型組各時(shí)間點(diǎn)胰腺組織病理學(xué)損傷評(píng)分高于對(duì)照組及曲美他嗪組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，差異有顯著性（P＜0.05）;曲美他嗪干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)大鼠胰腺組織病理學(xué)損傷評(píng)分高于對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)，差異有顯著性（P＜0.05）。
　　7.免疫組化檢測(cè)顯示：對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)大鼠胰腺組織V

9、EGF和iNOS均少量表達(dá)，評(píng)分變化不明顯；模型組各時(shí)間點(diǎn)胰腺組織VEGF和iNOS免疫組化評(píng)分均高于對(duì)照組及曲美他嗪組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，差異有顯著性（P＜0.05）;曲美他嗪干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)大鼠胰腺組織VEGF和iNOS免疫組化評(píng)分低于對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)，差異有顯著性（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.急性胰腺炎時(shí)HIF-1α、iNOS、NO、VEGF表達(dá)增多在胰腺損傷中有著重要的作用。
　　2.本研究結(jié)果提示：曲美他嗪對(duì)