曲美他嗪對急性胰腺炎大鼠HIF-1α-iNOS-NO信號通路及HIF-1α-VEGF信號通路的作用.pdf

1、目的：研究曲美他嗪對曲美他嗪對急性胰腺炎大鼠HIF-1α-iNOS-NO信號通路及HIF-1α-VEGF信號通路的作用。
　　方法：清潔級健康雄性SD大鼠54只（體重240g-260g），適應性喂養(yǎng)1周后隨機分為三組：對照組（A組，n=18只）；AP模型組（B組， n=18只）；曲美他嗪干預組（C組，n=18只）。對照組大鼠開腹后僅翻動腸管；采用膽胰管逆行注射4％?；悄懰徕c溶液（1ml/kg，0.2 mL/min）建AP模型；于A

2、P制模蘇醒后予曲美他嗪（5mg/kg，溶于生理鹽水）灌胃，建立曲美他嗪干預組。每組于制模后按6h、12h、24h分成3個亞組，于上述時間點處死大鼠取靜脈血、胰腺組織，每時點取大鼠6只。以酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測血清中IL-6的濃度；比色法測定血清中淀粉酶及NO濃度；免疫組化法檢測胰腺組織中VEGF和iNOS含量；Western blot法檢測胰腺組織中HIF-1α含量；取胰腺組織，10%甲醛固定，制成石蠟切片，用于HE染色，光鏡

3、下觀察胰腺病理損傷情況。
　　結(jié)果：
　　1.血清淀粉酶水平：對照組各時間點血清淀粉酶升高不明顯；模型組大鼠血清淀粉酶自制模后逐漸升高；曲美他嗪干預組大鼠血清淀粉酶在6h、12h、24h呈逐漸下降趨勢。與對照組相比較，模型組各時間點大鼠血清淀粉酶水平均顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，曲美他嗪干預組各時間點大鼠血清淀粉酶水平顯著降低（P＜0.05）。
　　2.血清IL-6水平：對照組大鼠血清IL-6各時間點無顯著

4、差異。模型組各時間點血清IL-6水平較對照組均有明顯升高（P＜0.05）；曲美他嗪治療組與模型組相比，各時間點血清IL-6水平有所降低（P＜0.05）；模型組各時間點血清IL-6水平呈逐漸上升趨勢（P＜0.05）；曲美他嗪治療組各時間點血清IL-6水平呈逐漸下降趨勢（P＜0.05）。
　　3.血清NO水平：對照組大鼠血清NO各時間點無顯著差異。模型組各時間點血清NO水平較對照組均有明顯升高（P＜0.05）；曲美他嗪治療組與模型組相

5、比，各時間點血清NO水平有所降低（P＜0.05）；模型組各時間點血清NO水平呈逐漸上升趨勢（P＜0.05）；曲美他嗪治療組各時間點血清NO水平呈逐漸下降趨勢（P＜0.05）。
　　4.HIF-1α的表達水平：對照組大鼠胰腺組織HIF-1α表達水平各時間點無顯著差異。模型組各時間點胰腺組織HIF-1α表達水平較對照組均有明顯升高（P＜0.05）；曲美他嗪治療組與模型組相比，各時間點胰腺組織HIF-1α表達水平有所降低（P＜0.05）

6、；模型組各時間點胰腺組織HIF-1α表達水平呈逐漸上升趨勢（P＜0.05）；曲美他嗪治療組各時間點胰腺組織HIF-1α表達水平呈逐漸下降趨勢（P＜0.05）。
　　5.大鼠胰腺大體標本觀察：對照組：肉眼觀胰腺無明顯水腫、壞死或出血表現(xiàn)，腹腔無積液。光鏡下胰腺小葉界限明確，腺泡結(jié)構(gòu)完整，間質(zhì)未見水腫，有少量炎癥細胞浸潤，且各時間點無明顯差別。
　　模型組：肉眼觀可見胰腺組織水腫，少量胰腺腺葉壞死，腹腔可見少量血性積液。胰腺壞死

7、面積隨著制模時間延長逐漸擴大，出血灶、鈣化斑及血性腹腔積液量隨時間延長增加。6h組光鏡下可見少量炎癥細胞浸潤，間質(zhì)少量出血，部分胰腺腺泡細胞壞死；12h組光鏡下可見炎癥細胞浸潤，間質(zhì)出血，腺泡細胞壞死較前加重；24h組光鏡下可見大量炎癥細胞浸潤，間質(zhì)出血增多，胰腺腺泡細胞壞死，胰腺小葉結(jié)構(gòu)破壞，大片胰腺實質(zhì)細胞壞死。
　　曲美他嗪干預組：肉眼觀可見胰腺組織充血水腫，無明顯出血、壞死表現(xiàn)，腹腔無積液。光鏡下胰腺間質(zhì)明顯水腫,少量炎癥

8、細胞浸潤及極少量腺泡細胞壞死，且各時間點無明顯差別。
　　6.大鼠胰腺組織病理學評分結(jié)果：按照Schmidt’s方法進行評分，對照組各時間點大鼠胰腺病理損傷評分變化不明顯；模型組各時間點胰腺組織病理學損傷評分高于對照組及曲美他嗪組各相應時間點，差異有顯著性（P＜0.05）;曲美他嗪干預組各時間點大鼠胰腺組織病理學損傷評分高于對照組各時間點，差異有顯著性（P＜0.05）。
　　7.免疫組化檢測顯示：對照組各時間點大鼠胰腺組織V

9、EGF和iNOS均少量表達，評分變化不明顯；模型組各時間點胰腺組織VEGF和iNOS免疫組化評分均高于對照組及曲美他嗪組各相應時間點，差異有顯著性（P＜0.05）;曲美他嗪干預組各時間點大鼠胰腺組織VEGF和iNOS免疫組化評分低于對照組各時間點，差異有顯著性（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.急性胰腺炎時HIF-1α、iNOS、NO、VEGF表達增多在胰腺損傷中有著重要的作用。
　　2.本研究結(jié)果提示：曲美他嗪對