肝細胞肝癌中HIF-1、VEGF的表達及EGCG抑制肝癌細胞增殖作用的研究.pdf

1、第一部分肝細胞肝:癌中HIF-1、VEGF的相關表達研究目的:缺氧誘導因子-1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)是廣泛存在于哺乳動物體內的一種轉錄因子,缺氧狀態(tài)下可以調節(jié)多種靶基因如血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等的表達.在腫瘤的缺氧反應過程中轉錄因子HIF-1起著中樞紐帶的作用.HIF-l是一種由α、β亞基組成的異二聚體,HIF-1

2、α是HIF-1的特異性活性調節(jié)亞基,缺氧刺激下HIF-l α的表達水平增加,與HIF-1 β亞基形成穩(wěn)定的二聚體,在共活化因子(如CBP、P300等)協(xié)助下,結合至靶基因的缺氧反應元件(hypoxia responsive element,HRE),上調靶基因的表達.HIF-1 α亞基的氨基酸401-603區(qū)域為氧依賴性降解區(qū)(oxygen-dependent degradation domain,ODD).常氧狀態(tài)下,HIF-1 α蛋

3、白通過ODD區(qū)域在VHL蛋白介導下被泛素化,被蛋白酶迅速降解(半衰期<5分鐘).隨著氧濃度的降低,HIF-1 α蛋白降解過程被抑制,蛋白水平呈指數(shù)增長.VEGF是HIF-1的重要靶基因之一.缺氧時VEGF的轉錄和mRNA的穩(wěn)定性均有增加.HIF-1通過與VEGF基因缺氧反應元件(5'-TACGTG-GC-3')結合,上調其轉錄.并且缺氧下RNA結合蛋白與VEGF的mRNA 3'端富含A、U的序列結合,阻斷mRNA降解.研究肝細胞肝癌缺氧

4、反應下,HIF-1和VEGF的相關表達變化,旨在探討其在肝細胞肝癌發(fā)生、發(fā)展中的作用,及其相互調控機制.結論HIF-1 α和VEGF在肝細胞肝癌的缺氧反應中占據(jù)重要地位,缺氧狀態(tài)下HIF-1 α蛋白含量提高,形成活性HIF-1,上調靶基因VEGF的表達,參與腫瘤的血管生成和發(fā)生發(fā)展過程.第二部分EGCG對肝細胞肝癌的增殖抑制作用和對缺氧反應的影響目的:綠茶含有多種茶多酚,其中含量最高的成分是:表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epirigall

5、ocatechin-3-gallate,EGCG).EGCG主要有抗氧化、清除自由基、抗炎、抗病毒、抗突變和抗腫瘤形成等生物學活性和藥理效應.研究發(fā)現(xiàn)EGCG可誘導多種腫瘤細胞包括肺癌細胞、胃癌細胞、結腸癌細胞等的凋亡;可以通過阻滯腫瘤細胞的生長周期而抑制其生長;并且可以抑制蛋白酪氨酸激酶的活性,從而使某些酪氨酸蛋白不能磷酸化,抑制細胞生長.尿激酶是腫瘤生長的關鍵酶,腫瘤侵襲轉移需要尿激酶等蛋白水解酶的參與,EGCG可與尿激酶結合,干擾

6、尿激酶與底物結合,從而抑制酶活性.EGCG還可以通過調節(jié)體內一些與癌變有關的酶如鳥氨酸脫羧酶(ODC)、超氧化物岐化酶(SOD)等的活性達到抑制癌基因的表達;抑制某些化學致癌物如亞硝酸鹽、二甲肼、黃曲霉素等強烈的化學致癌物對癌癥的誘發(fā)作用;提高機體的免疫功能,刺激人外周血單核細胞產(chǎn)生IL-1和TNF,從而發(fā)揮抗癌作用.該課題的研究目的就在于研究EGCG是否可以抑制肝細胞肝癌的增殖,以及探討EGCG對腫瘤細胞缺氧反應的作用及作用機制.結論