SARS冠狀病毒S蛋白抗原表位分析與定位研究.pdf_第1頁(yè)
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1、嚴(yán)重急性呼吸綜合癥(Severeacuterespiratorysyndrome，SARS)是由SARS冠狀病毒(SARS-CoV)引起的人類(lèi)新發(fā)傳染病，S、M、N、E蛋白是SARS-CoV病毒粒子的幾種主要結(jié)構(gòu)蛋白。用Lasergene軟件系統(tǒng)分析SARS病毒結(jié)構(gòu)蛋白S、M、N蛋白，預(yù)測(cè)了12個(gè)抗原表位，用這些預(yù)測(cè)表位序列設(shè)計(jì)組合成四個(gè)嵌合基因SSCV-A、SSCV-B、SSCV-C、SSCV-D。人工合成后插入pGEX-6p-1的B

2、amHI和XhoI位點(diǎn)間，構(gòu)建成融合表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化宿主菌BL21經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后嵌合基因表達(dá)產(chǎn)物為可溶性蛋白。經(jīng)免疫印跡試驗(yàn)表明嵌合基因表達(dá)產(chǎn)物可被SARS康復(fù)患者血清所識(shí)別，表明重組融合蛋白具有免疫反應(yīng)性，提示預(yù)測(cè)表位中含有SARS-CoV結(jié)構(gòu)蛋白的抗原表位?！　”緦?shí)驗(yàn)鑒定出了7個(gè)S蛋白線性抗原表位：SRBD3，D3C5，D3D1，S1C3，S1C4，S1C7/8，S1C10/11，和一個(gè)S蛋白模擬表位。對(duì)進(jìn)一步分析S蛋白的結(jié)構(gòu)與功

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