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1、目的:觀察蒙古沙鼠短暫性前腦缺血再灌注損傷及西比靈干預(yù)后aB一晶體蛋白、MAP一2(微管相關(guān)蛋白一2)表達(dá)的變化,研究二者表達(dá)的相關(guān)性及相應(yīng)的保護(hù)機(jī)制,進(jìn)一步探討其在短暫性腦缺血發(fā)作(TIA)中的意義; 方法: (1)分組:健康雄性蒙古沙鼠50只,分為正常對(duì)照組,假手術(shù)組,腦缺血再灌注組(I/R),西比靈干預(yù)組(XI/R),觀察在I/R后6小時(shí)(I/R6h—XI/R6h),1天(I/R1d-XI/R1d),3天(I/R
2、3d-XI/R3d),7天(I/R7d-XI/R7d)各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)aB-晶體蛋白、MAP-2的表達(dá);(2)模型制作:對(duì)照組沙鼠予以夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈缺血10分鐘后再灌注,其中假手術(shù)組僅分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈,不予夾閉,西比靈干預(yù)組在缺血再灌注前一天予以西比靈灌胃(20mg/kg·d),而后建立缺血再灌注模型;(3)HE染色觀察病理變化;(4)免疫熒光雙重染色,免疫組織化學(xué)觀察表達(dá)變化。 結(jié)果:(1)HE染色:腦缺血再灌注組可見膠
3、質(zhì)細(xì)胞增生肥大,問質(zhì)水腫及神經(jīng)細(xì)胞水腫,少量神經(jīng)元灶性壞死;西比靈干預(yù)組:XI/R6h組,XI/R1d組,XI/R3d組,XI/R7d組分別同腦缺血再灌注組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較,其損傷程度均明顯輕于缺血再灌注組。(2)免疫組化:正常對(duì)照組aB-晶體蛋白和MAP-2在前腦神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞胞漿中均有表達(dá),aB-晶體蛋白以膠質(zhì)細(xì)胞特征性核周表達(dá)為主,MAP-2以神經(jīng)元表達(dá)較強(qiáng),缺血再灌注損傷后隨著時(shí)間推移,aB-晶體蛋白表達(dá)上調(diào),于第三天達(dá)到最高
4、 (與對(duì)照組比較P<0.05),MAP-2于缺血后6小時(shí)表達(dá)明顯下調(diào),并隨著時(shí)間的推移,以及aB晶體蛋白的上調(diào),逐漸恢復(fù)表達(dá);西比靈干預(yù)前后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)aB-晶體蛋白表達(dá)差異的比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);MAP-2在西比靈干預(yù)后1d組,3d組,7d組的表達(dá)均高于缺血再灌注組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)(P<0.05),在第七天時(shí)表達(dá)已恢復(fù)至接近正常水平。 (3)缺血再灌注組免疫熒光雙重染色支持免疫組織化學(xué)染色aB-晶體蛋白陽性膠質(zhì)細(xì)胞特征性核周環(huán)
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