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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究大鼠胰腺組織在熱休克蛋白60(HSP60)被干擾后,對(duì)脂多糖(LPS)、急性胰腺炎血清(APs)、急性胰腺炎腹水(APa)等損傷因子刺激的反應(yīng),以探討HSP60對(duì)胰腺組織的可能的保護(hù)作用。
方法:分離培養(yǎng)大鼠離體胰腺組織塊,用LPS、APs、APa刺激離體胰腺組織塊,以NS作為對(duì)照,在作用前和作用后1、2、4h時(shí)間點(diǎn)測(cè)定以下指標(biāo):采用碘-淀粉比色法測(cè)定上清液中淀粉酶水平;采用ELISA法測(cè)定上清液中腫瘤壞死因子(
2、TNF-a)水平;采用MTT法檢測(cè)胰腺組織的活力;采用Realtime-PCR測(cè)定胰腺組織HSP60的表達(dá)量。然后用RNA干擾技術(shù)抑制離體胰腺組織中HSP60的表達(dá)后,再用LPS、APs、APa刺激胰腺組織,同樣在1、2、4h時(shí)間點(diǎn)測(cè)定上述指標(biāo)的變化。
結(jié)果:LPS、APs、APa刺激離體胰腺組織后1h,胰腺組織的活力與對(duì)照組比較稍有降低,上清液中淀粉酶水平、上清液中TNF-a水平、離體胰腺組織HSP60的表達(dá)量比對(duì)照組有
3、所增高,但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在刺激后2h、4h,離體胰腺組織的活力、胰腺組織HSP60的表達(dá)量明顯降低(P<0.05),培養(yǎng)上清液中淀粉酶和TNF-a水平與對(duì)照組比較明顯增高(P<0.05)。RNA干擾離體胰腺組織的HSP60后,用LPS、APs、APa刺激胰腺組織,與對(duì)照組及HSP60未干擾組比較,刺激后1h胰腺組織HSP60的表達(dá)量降低(P<0.05),胰腺組織的活力降低(P<0.05),上清液中淀粉酶和TNF-a水平均明顯增高(
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