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文檔簡介
1、目的:HBx(Hepatitis B x-protein)是乙型肝炎病毒基因組x區(qū)所編碼,具有多種生物活性的蛋白質.目前研究表明,HBx與乙型肝炎病毒感染宿主細胞的過程有關,并參與介導體內特異性和非特異性免疫過程,使肝細胞受損,此外研究還發(fā)現HBx與肝細胞癌(HCC,Hepatocyte Carcinoma)的發(fā)生關系密切,但具體機制尚存在爭議.為了更好的了解HBx在體內、體外的多種生物學作用,闡明其在HCC形成過程中所發(fā)揮作用的機理,
2、構建乙型肝炎病毒x基因表達載體,獲得其表達產物x蛋白就顯的尤為必要.該研究即以此為立題依據,目的是克隆乙型肝炎病毒基因組中的x開放讀碼區(qū)(即x基因),并構建其原核表達載體,而后將其導入大腸桿菌,誘導其表達,以期獲得x基因的表達產物x蛋白,為后續(xù)進一步研究其生物學活性及其在HCC發(fā)生過程中的作用奠定實驗基礎.結論:通過設計合適的引物,可成功的對乙型肝炎病毒x開放讀碼區(qū)(x基因)進行擴增,并可根據需要在相應的上下游引物5′端引入限制性內切酶
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