血管緊張素-（1-7）對血管緊張素Ⅱ誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞E-選擇素和單核細胞趨化蛋白-1的影響.pdf

1、目的：通過對Ang-(1-7)對血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)誘導人臍靜脈細胞(HUVECs)分泌E-sel和MCP-1的觀察，闡明Ang-(1-7)拮抗AngII所致的動脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)，并初步探討Ang-(1-7)的作用機制。 方法：1、經(jīng)形態(tài)學及抗Ⅷ因子抗體免疫熒光染色鑒定的人臍靜脈內(nèi)皮細胞，按以下分組加入不同干擾因素進行實驗；2、實驗分組①對照組：不加干預(yù)因素；②AngⅡ組：加入AngⅡ 100nmol/L；③Ang-(1

2、-7)組：加入Ang-(1-7)1000nmol/L；④Ang Ⅱ+Ang-(1-7)組：分別用Ang-(1-7)10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L、10000nmol/L預(yù)處理30min后，再加入Ang Ⅱ 100nmol/L；⑤AngⅡ+Ang-(1-7)+A-779組：先用1000nmol/LA-779預(yù)處理30min后，再用終濃度為1000nmol/L Ang-(1-7)預(yù)處理30min，最后加入終濃度1

3、00nmol/L Ang Ⅱ；3、各組用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和半定量RT-PCR法從蛋白和mRNA水平檢測E-sel和MCP-1的表達情況。 結(jié)果：1、正常細胞生長良好，呈鵝卵石樣鑲嵌排列，細胞透明度大，輪廓不清。熒光免疫組化染色法，可檢測到培養(yǎng)的HUVEC的Ⅷ因子相關(guān)抗原為陽性；2、與對照組比，AngⅡ(100nmol/L)使E-sel和MCP-1的蛋白分泌量明顯增加，E-sel和MCP-1 mRNA的表達顯著升高(P

4、<0.01)；Ang-(1-7)(1000nmol/L)使E-sel和MCP-1的蛋白分泌量降低，E-sel和MCP-1 mRNA表達亦降低(P<0.01)；3、混合刺激組中，與AngⅡ組比較，Ang-(1-7) (10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L、10000 nmol/L)呈劑量依賴性的抑制Ang Ⅱ刺激E-sel、MCP-1的蛋白分泌和E-sel、MCP-1 mRNA的表達(P<0.01)；4、加入A-77