利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選與大麥黃矮病毒編碼蛋白互作的短肽.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　酵母雙雜交系統(tǒng)是研究蛋白質(zhì)問相互作用的一種有效方法。該系統(tǒng)能迅速、靈敏地在真核細(xì)胞體內(nèi)檢測蛋白生理狀態(tài)下的互作，并可快速獲得目的蛋白的編碼基因，近幾年來已在植物病毒學(xué)的很多領(lǐng)域得到應(yīng)用。本研究利用雙雜交系統(tǒng)篩選與大麥黃矮病毒GPV株系的移動(dòng)蛋白和外殼蛋白以及GAV株系的移動(dòng)蛋白互作的短肽，并對獲得的短肽進(jìn)行初步研究，為研究該病毒的致病機(jī)制，培育抗病毒小麥奠定基礎(chǔ)。　　本文根據(jù)已知的大麥黃矮病毒GAV株系和GPV株系的移動(dòng)蛋白(M

2、ovementProteinMP)基因序列以及GPV株系的外殼蛋白(CP)基因序列分別合成上下游引物，通過PCR擴(kuò)增獲得目的片段后構(gòu)建了酵母表達(dá)載體pGBKT7-GAV-MP、pGBKT7-GPV-MP和pGBKT7-GPV-CP用于在酵母雙雜交分析中表達(dá)誘餌融合蛋白?！　∮胮GBKT7-GPV-MP篩選Clontech公司的隨機(jī)肽庫，獲得了兩種和該蛋白互作的短肽，分別為：PHRGGLEWMGAIAGPV、TVSRRMRDCRQRIV

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