大麥黃矮病毒運動蛋白與AtVOZ1和AtVOZ2互作并延遲擬南芥開花.pdf

1、大麥黃矮病毒（Barelyyellow dwarf viruses，BYDVs）侵染多種禾本科作物，呈現多種發(fā)病癥狀同時也給世界糧食生產造成嚴重的損失。其在小麥上的癥狀主要有植物矮化、葉片黃化，除此之外在燕麥上還能造成分蘗和抽穗的減少。而目前對于這種癥狀的產生原因研究的還不是很清楚。為了更好地控制小麥病毒病發(fā)生，研究該病癥的發(fā)病機制勢在必行。大麥黃矮病毒的運動蛋白(Movement Protein，MP)的主要功能是結合病毒RNA，增大

2、胞間連絲孔徑并促使其在植物細胞間運輸。但是對于MP對植物生理生化方面的影響研究的還是較少。因此，本研究針對BYDV-GAV MP對模式植物擬南芥生理生化方面的影響進行了研究，主要結果如下:
　　1.通過酵母雙雜交實驗，發(fā)現在擬南芥中能夠與MP蛋白互作的是兩個轉錄因子，維管植物鋅指蛋白AtVOZ1和AtVOZ2。利用雙分子熒光互補實驗(BiFC)，進一步驗證MP與AtVOZ1和AtVOZ2是能夠相互作用的，且互作的位置是細胞質。根據

3、MP蛋白的關鍵結構域，對MP片段進行缺失突變，構建了MP(DH1)、MP(DH2)、MP(DH3)三個突變體。通過雙分子熒光互補實驗，結果表明只有MP(DH2)不能與AtVOZ1和AtVOZ2互作，而MP(DH2)是缺失了MP的N端1-81aa，即MP的核定位信號區(qū)域，說明MP的N端核定位信號在互作中是必須的。
　　2.由于AtVOZ1和AtVOZ2是控制擬南芥開花通路上的關鍵基因。我們通過農桿菌浸花轉序的方法構建MP轉基因擬南芥

4、。探究轉基因植株是否產生開花方面的表型差異。結果顯示，同時播種野生型和轉基因擬南芥，開花時，轉基因擬南芥蓮座葉數目比野生型顯著增多，同時轉基因擬南芥經過更長的時間才開始開花。MP轉基因擬南芥表現晚花表型，也就是MP影響了擬南芥的開花表型。
　　3.AtVOZ1和AtVOZ2是光周期通路phyB途徑上的關鍵基因。為了探究MP轉基因植株出現的晚花表型是否與phyB途徑有關，通過實時熒光定量PCR試驗，測定轉基因擬南芥及野生型擬南芥ph