11003.不同底物誘導(dǎo)下白囊耙齒菌的酶學(xué)性質(zhì)及胞內(nèi)蛋白質(zhì)組學(xué)分析

1、學(xué)校代碼：10225學(xué)號：S14556學(xué)位論文不同底物誘導(dǎo)下白囊耙齒茵的酶學(xué)性質(zhì)及胞內(nèi)蛋白質(zhì)組學(xué)分析指導(dǎo)教師姓名：申請學(xué)位級別：論文提交日期：授予學(xué)位單位：李海峰王秋玉教授東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)科專業(yè)：遺傳學(xué)2014年4月論文答辯日期：2014年6月14日東北林業(yè)大學(xué)授予學(xué)位日期：2014年6月25日答辯委員會主席：論文評閱人：春多厶櫛景犬學(xué)摘要摘要本文以木材白腐真菌白囊靶齒菌為研究材料，探討其在PDA固體平板培養(yǎng)基中生長趨勢，發(fā)王見它與大

2、多數(shù)真菌生長特點一樣，即起始較為緩慢，之后生長迅速呈指數(shù)上升，最后轉(zhuǎn)為平緩增長。在不同的培養(yǎng)溫度下(23℃、28℃)，其生長速度差異較大，在28℃條件下的生長速度高于23℃條件，說明白囊靶齒菌更適合在28℃下生長。采用白樺和云杉木屑為誘導(dǎo)物，非木屑處理為對照，檢測了白囊靶齒菌分泌的木質(zhì)纖維素酶活性，研究顯示該菌分泌的木質(zhì)素降解酶中漆酶活性最強(qiáng)，木質(zhì)素過氧化物酶次之，錳過氧化物酶活性最低。木屑誘導(dǎo)下的白囊靶齒菌產(chǎn)生的木質(zhì)素降解相關(guān)酶酶活性

3、大都高于對照樣品，且錳過氧化物酶和漆酶活性在處理組與對照組間差異達(dá)顯著和極顯著水平。纖維素酶酶活中葡萄糖外切酶活性遠(yuǎn)大于葡萄糖內(nèi)切酶活性，而外切酶活性隨培養(yǎng)時間增加而上升，內(nèi)切酶活性是先上升后下降，兩種酶活總體上趨于穩(wěn)定，表達(dá)量較高，受培養(yǎng)時間的影響變化不明顯。利用2DE雙向電泳和考染串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)分析了白囊耙齒菌在不同樹種木屑誘導(dǎo)下的菌體胞內(nèi)蛋白質(zhì)組變化，未加木屑的對照組檢測到823個蛋白質(zhì)點，白樺處理組檢測到673個蛋白質(zhì)點，云杉處理

4、組檢測到684個蛋白質(zhì)點。與對照組相比，在白樺和云杉木屑處理組中檢測發(fā)現(xiàn)32個明顯差異蛋白點，有22個蛋白點是上調(diào)表達(dá)，10個蛋白點下調(diào)表達(dá)。白樺和云杉處理組各有3個特異差異蛋白點，白樺木材誘導(dǎo)下特異表達(dá)蛋白與膜蛋白、膜運輸和能量提供有關(guān)，而云杉誘導(dǎo)組特異表達(dá)蛋白均與蛋白合成有關(guān)。在全部的差異蛋白點中有三個蛋白點與哺乳動物的蛋白質(zhì)有很高的同源性。而675、506、508、228、和211五個差異蛋白點的質(zhì)譜結(jié)果顯示為假設(shè)蛋白，其功能目前