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文檔簡介
1、本課題以公雞為試驗動物,在日糧中添加一定濃度的氟及硒與氟,復(fù)制公雞氟中毒及硒頡頏模型。通過對試驗雞臨床表現(xiàn)、剖檢變化、病理組織學(xué)觀察、凋亡現(xiàn)象以及睪丸組織p53、 Caspase-3mRNA的表達等指標的測定,探討硒頡頏氟致公雞生殖毒性的效應(yīng)。研究結(jié)果表明: 1.氟可影響公雞體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)功能,使血清和睪丸中GSH-Px、SOD活性降低,MDA含量升高,構(gòu)成了氟損傷機體的病理學(xué)基礎(chǔ)。加硒后可提高GSH-Px、SOD活性,降低MD
2、A含量,說明硒能頡頏氟對公雞抗氧化損傷作用。 2.氟能降低血清中睪丸酮、促卵泡生成激素、雌二醇和生長激素的含量,增加黃體生成素含量,加硒后可使血清中睪丸酮、促卵泡生成激素、雌二醇和生長激素含量增加,使黃體生成素含量降低。 3.通過原位末端標記檢測和組織超微結(jié)構(gòu)觀察,發(fā)現(xiàn)氟中毒可引起公雞睪丸組織細胞凋亡,加硒后可減少此作用,說明硒能頡頏氟引起公雞睪丸組織細胞的凋亡。 4.通過對睪丸微觀結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)的觀察,證實氟引
3、起線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及細胞核等的損傷,破壞血睪屏障,導(dǎo)致間質(zhì)細胞、支持細胞、生精細胞的壞死或凋亡,硒能減輕氟對細胞器的損傷。 5.應(yīng)用堿性單細胞凝膠電泳測定和DNA Ladder分析氟對生殖細胞DNA的損傷效應(yīng),結(jié)果表明氟能夠引起公雞生殖細胞DNA損傷,硒能減輕氟對生殖細胞DNA的損傷,說明硒能頡頏氟致公雞生殖細胞的損傷。 6.應(yīng)用半定量RT-PCR法檢測了雞生殖細胞內(nèi)p53、caSpaLse-3mRNA表達水平,結(jié)果表明氟
4、能增加生殖細胞內(nèi)p53、Caspase-3mRNA的表達水平,進而誘導(dǎo)生殖細胞凋亡,硒能頡頏氟所致的生殖細胞p53、Caspase-3mRNA表達量的增加,進而減輕氟所致生殖細胞的凋亡。 本試驗從器官、細胞、亞細胞和分子水平上探討氟致公雞生殖功能毒性的作用,揭示了硒能頡頏氟所引起的生殖細胞活性降低、氧化應(yīng)激誘發(fā)、細胞DNA損傷、細胞內(nèi)基因表達增加、細胞凋亡增加,硒頡頏試驗組公雞與氟中毒試驗組公雞在病理組織學(xué)上改變的差異為判斷和分
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