硒頡頏氟致公雞生殖毒性的研究.pdf

1、本課題以公雞為試驗(yàn)動(dòng)物，在日糧中添加一定濃度的氟及硒與氟，復(fù)制公雞氟中毒及硒頡頏模型。通過(guò)對(duì)試驗(yàn)雞臨床表現(xiàn)、剖檢變化、病理組織學(xué)觀察、凋亡現(xiàn)象以及睪丸組織p53、 Caspase-3mRNA的表達(dá)等指標(biāo)的測(cè)定，探討硒頡頏氟致公雞生殖毒性的效應(yīng)。研究結(jié)果表明： 1.氟可影響公雞體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)功能，使血清和睪丸中GSH-Px、SOD活性降低，MDA含量升高，構(gòu)成了氟損傷機(jī)體的病理學(xué)基礎(chǔ)。加硒后可提高GSH-Px、SOD活性，降低MD

2、A含量，說(shuō)明硒能頡頏氟對(duì)公雞抗氧化損傷作用。 2．氟能降低血清中睪丸酮、促卵泡生成激素、雌二醇和生長(zhǎng)激素的含量，增加黃體生成素含量，加硒后可使血清中睪丸酮、促卵泡生成激素、雌二醇和生長(zhǎng)激素含量增加，使黃體生成素含量降低。 3．通過(guò)原位末端標(biāo)記檢測(cè)和組織超微結(jié)構(gòu)觀察，發(fā)現(xiàn)氟中毒可引起公雞睪丸組織細(xì)胞凋亡，加硒后可減少此作用，說(shuō)明硒能頡頏氟引起公雞睪丸組織細(xì)胞的凋亡。 4．通過(guò)對(duì)睪丸微觀結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)的觀察，證實(shí)氟引

3、起線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及細(xì)胞核等的損傷，破壞血睪屏障，導(dǎo)致間質(zhì)細(xì)胞、支持細(xì)胞、生精細(xì)胞的壞死或凋亡，硒能減輕氟對(duì)細(xì)胞器的損傷。 5．應(yīng)用堿性單細(xì)胞凝膠電泳測(cè)定和DNA Ladder分析氟對(duì)生殖細(xì)胞DNA的損傷效應(yīng)，結(jié)果表明氟能夠引起公雞生殖細(xì)胞DNA損傷，硒能減輕氟對(duì)生殖細(xì)胞DNA的損傷，說(shuō)明硒能頡頏氟致公雞生殖細(xì)胞的損傷。 6．應(yīng)用半定量RT-PCR法檢測(cè)了雞生殖細(xì)胞內(nèi)p53、caSpaLse-3mRNA表達(dá)水平，結(jié)果表明氟

4、能增加生殖細(xì)胞內(nèi)p53、Caspase-3mRNA的表達(dá)水平，進(jìn)而誘導(dǎo)生殖細(xì)胞凋亡，硒能頡頏氟所致的生殖細(xì)胞p53、Caspase-3mRNA表達(dá)量的增加，進(jìn)而減輕氟所致生殖細(xì)胞的凋亡。 本試驗(yàn)從器官、細(xì)胞、亞細(xì)胞和分子水平上探討氟致公雞生殖功能毒性的作用，揭示了硒能頡頏氟所引起的生殖細(xì)胞活性降低、氧化應(yīng)激誘發(fā)、細(xì)胞DNA損傷、細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)增加、細(xì)胞凋亡增加，硒頡頏試驗(yàn)組公雞與氟中毒試驗(yàn)組公雞在病理組織學(xué)上改變的差異為判斷和分