PFOS致劍尾魚(yú)雌激素效應(yīng)和生殖發(fā)育毒性的研究.pdf

1、全氟辛烷磺酸類化合物（perfluorooctane sulfonates，PFOS）在環(huán)境中廣泛分布，并具有環(huán)境持久性。以哺乳類和魚(yú)類為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物探討其毒性效應(yīng)的研究也越來(lái)越多。然而，現(xiàn)有關(guān)于PFOS毒性研究的實(shí)驗(yàn)結(jié)論（例如：雌激素效應(yīng)，生長(zhǎng)和發(fā)育毒性等）在很大程度上不一致。這主要是由設(shè)置的毒性研究實(shí)驗(yàn)方案差異造成的（例如：染毒時(shí)間，染毒濃度，實(shí)驗(yàn)物種和檢測(cè)手段等）。目前，卵生魚(yú)類在研究PFOS致水生動(dòng)物毒理效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)中得到了廣泛應(yīng)用。

2、但是，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)已公開(kāi)的以卵胎生魚(yú)類為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的PFOS毒理學(xué)數(shù)據(jù)。劍尾魚(yú)（Xiphophorus helleri）是一種體型小、易養(yǎng)殖的卵胎生魚(yú)類。因此，本實(shí)驗(yàn)采用了劍尾魚(yú)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)研究PFOS的雌激素效應(yīng)、生殖毒性和生長(zhǎng)發(fā)育毒性。
　　 將雄性劍尾魚(yú)（具有由尾鰭下緣延長(zhǎng)生長(zhǎng)形成的尾劍）暴露于一系列濃度PFOS（0，0.1，0.5和2.5 mg/l）三周，然后轉(zhuǎn)入凈水中養(yǎng)殖一周，檢測(cè)其卵黃蛋白原（vitellogenin，VT

3、G）mRNA轉(zhuǎn)錄情況，并以此評(píng)價(jià)PFOS引起的雌激素效應(yīng)；將雌魚(yú)暴露于與雄魚(yú)相同的實(shí)驗(yàn)條件下六周，檢測(cè)其生殖情況并以此評(píng)價(jià)PFOS引起的生殖毒性；將幼魚(yú)（出生20～30天）暴露于0 mg/l和0.1 mg/l PFOS兩個(gè)實(shí)驗(yàn)濃度下90天，檢測(cè)其生長(zhǎng)發(fā)育狀況并以此評(píng)價(jià)PFOS引起的生長(zhǎng)發(fā)育毒性。
　　 實(shí)驗(yàn)初期，本文成功克隆了劍尾魚(yú)卵黃蛋白原VTG-A的cDNA序列全長(zhǎng)（GenBank Accession Number：GU43

4、4164），共5283 bp，開(kāi)放閱讀框（open reading frame，ORF；22～5181bp）編碼1720個(gè)氨基酸。在第一周和第二周末期，染毒組VTG mRNA的轉(zhuǎn)錄受到顯著抑制，而在第三周末時(shí)轉(zhuǎn)錄顯著上調(diào)；在第四周末期時(shí)只有最高濃度組的依舊保持高轉(zhuǎn)錄水平。在第三周末期，2.5 mg/l染毒組雄魚(yú)肝體指數(shù)（hepatosomatic index，HSI）顯著升高。在染毒期末，0.1 mg/l組幼魚(yú)的HSI也顯著升高。0.5

5、 mg/l組雌魚(yú)和0.1 mg/l組雌性幼魚(yú)的性腺指數(shù)（gonadal somatic index，GSI）顯著升高。在生殖毒性實(shí)驗(yàn)部分，各組雌魚(yú)所產(chǎn)后代的14天存活率差異較大。PFOS暴露嚴(yán)重影響劍尾魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育，但本實(shí)驗(yàn)沒(méi)有觀察到對(duì)性別分化比例和雄性幼魚(yú)的第二性征產(chǎn)生負(fù)面影響。通過(guò)對(duì)2.5 mg/l組成年雌、雄個(gè)體的肝臟、性腺和成年雌性的腸道進(jìn)行組織切片觀察，發(fā)現(xiàn)肝臟受損傷程度嚴(yán)重，腸道內(nèi)表皮有一定程度的潰瘍，性腺（精、卵巢）無(wú)