長春花細(xì)胞培養(yǎng)與快速繁殖的初步研究.pdf

1、該文以長春花[Catharanthus roseus(L.)G.Don]幼嫩葉片為外植體,誘導(dǎo)和篩選愈傷組織,討論了不同光照對愈傷組織增殖的影響,研究了生長周期中生理生化特性和次生代謝物質(zhì)積累的規(guī)律;并對其快速繁殖作了初步探討,為長春花細(xì)胞培養(yǎng)積累資料.實驗結(jié)果如下:l、以長春花幼嫩葉片為外植體,不同種類、不同濃度的植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及其組合對愈傷組織誘導(dǎo)的效應(yīng)均不相同;長春花愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基是NAAO.5mg/L+2,4-D0.

2、5mg/L+6-BA2.Omg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L.2、光照和黑暗對愈傷組織增殖的影響:在光照和黑暗下,生長周期均為27d,增殖曲線呈"S"型,可大致分為延遲期(0~9d)、指數(shù)生長期(9~24d)和靜止期(24~27d).光照條件下愈傷組織生長稍快.3、在愈傷組織增殖的過程中,分別對其可溶性蛋白質(zhì)含量、過氧化物酶、超氧化物歧化酶和酯酶的活性進(jìn)行了測定和分析,結(jié)果表明它們都發(fā)生了各自特征性的變化.4、培養(yǎng)細(xì)胞中次生代謝物質(zhì)

3、的積累:光照和黑暗條件下生物堿的含量變化不盡相同,但第12d均出現(xiàn)一個峰值,并且從第18d起生物堿的含量呈上升趨勢.從生物堿的產(chǎn)量來看,在第27d產(chǎn)量達(dá)到最大值,因此收獲的最佳時期為第27d.最終,黑暗條件下生物堿的產(chǎn)量比光照時的高.5、再分化的初步研究表明:利用由葉片誘導(dǎo)而來的愈傷組織在培養(yǎng)基(2)(3)上均能分化出芽點,雖最初芽分化率不高,但可以大量增殖.芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+NAAO.1mg/L+6-BAO.5mg/L+蔗糖3