13764.擬南芥ringfingere3基因sinat1調控花粉萌發(fā)的初步研究

1、◎妻妊未更多碩士研究生學位論文題目：塑直薟世盥g：魚墜g皇!壁壘基國!塑型旦調控壟趨盟筮數墊生嬰究姓名j王劍嶠學號：10811079院系：生全盟堂堂瞳專業(yè)：生塹堂!生塹墊盔)研究方向：蕉塹盟絲基固塑堂導師姓名：星主k矗整撞亟壘壁整握二O一三年六月北京大學碩士研究生學位論文中文摘要配子體的發(fā)育是植物有性生殖世代交替的關鍵過程之一。在被子植物中，雄配子體的形成是一個有序而復雜的過程。以擬南芥為例，小孢子母細胞經過減數分裂，形成四個有功能的小

2、孢子；小孢子經過兩次細胞分裂形成了包含兩個精細胞和一個營養(yǎng)細胞的成熟花粉粒。花粉落到柱頭上后，經過吸水、萌發(fā)、并產生花粉管，花粉管以一種極性生長的方式將精細胞送入胚珠中?；ǚ勖劝l(fā)和花粉管的快速伸長需要植物體大量的能量和物質來保證，并受到多種因素的復雜調控，機制還不十分清楚。本課題的研究對象黝w“屬于擬南芥肋蜘瑾因家族的一個成員，編碼一個RING—fiIlger蛋白，該蛋白家族在多種植物及動物中均有同源蛋白。我分別從公共數據庫ABRc和N

3、Asc中獲得兩個獨立的T—DNA插入突變體，分別命名為5伽口“一J(CS833840)和s砌口fJ一2(CS907083)。對這兩個突變體雜合體后代進行基因型鑒定，發(fā)現(xiàn)其后代中均沒有純合體，且野生型和雜合體比例均為接近1：1?；ソ粚嶒灡砻?，對于Jf療日f』突變體，TDNA不能通過雄配于體傳遞。進一步的生化染色分析及花粉管萌發(fā)實驗表明，5加口fJ『雄配子體不育的表型很可能是由花粉不能正常萌發(fā)而引起的。實驗表明，齜刪刀基因主要在幼苗階段和成

4、株的花藥中表達；該基因所編：碼的蛋白主要定位于核內。生物信息學分析結果顯示，sINATl蛋白序列含有一個保守的sINA結構域和一個RINGfinger結構域。體外泛素化實驗證明，sINATl是一個在體外能行使E3連接酶功能的蛋白，很可能通過泛素一26s蛋白酶體依賴的蛋白降解途徑參與調節(jié)花粉萌發(fā)過程。為了進一步研究肼M盯基因調控花粉管萌發(fā)的可能機制，本論文使用了酵母雙雜交系統(tǒng)在擬南芥花序組織基因文庫中進行篩選。初步篩選結果及后續(xù)驗證表明，