豬繁殖與呼吸綜合征病毒核衣殼蛋白基因的克隆與原核表達(dá).pdf_第1頁(yè)
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1、豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的急性接觸性傳染病,1987年首次發(fā)生于美國(guó),隨后在世界各地傳播.1996年郭寶清等首次報(bào)道本國(guó)分離到PRRSV病原,目前該病已成為危害養(yǎng)豬業(yè)的主要疾病之一.建立針對(duì)該病的快速、有效的檢測(cè)方法是為中國(guó)豬群PRRSV流行病學(xué)調(diào)查及豬群免疫的重要基礎(chǔ).PRRSV ORF7編碼病

2、毒的核衣殼蛋白(N)是病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白,免疫原性強(qiáng)且在型內(nèi)高度保守.該實(shí)驗(yàn)根據(jù)PRRSV美洲型代表毒株的基因序列,設(shè)計(jì)了能夠擴(kuò)增其N基因的一對(duì)含有HindⅢ和BamHI酶切位點(diǎn)的引物,經(jīng)RT-PCR技術(shù)克隆出大小為372bp的基因片段,將該片段克隆到pMDl8-T載體,測(cè)序后,利用blast工具將其與GeneBank上美洲型代表毒株序列進(jìn)行了比較,結(jié)果表明該基因與美洲型代表毒株序列完全同源.將此基因亞克隆到pRESTB表達(dá)載體中,構(gòu)建

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