23246.kruppel樣因子4(klf4)在小鼠表皮干細胞中的表達和功能研究

1、華中科技大學博士學位論文Kruppel樣因子4(KLF4)在小鼠表皮干細胞中的表達和功能研究姓名：李娟申請學位級別：博士專業(yè)：干細胞指導教師：黃士昂201105華中科技大學博士學位論文4[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]KLF4；表皮干細胞；細胞表面標志；標記滯留；世系追蹤第二部分第二部分KLF4在小鼠表皮干細胞中的功能研究在小鼠表皮干細胞中的功能研究目的：目的：檢測KLF4在小鼠表皮干細胞中的功能。方法：方法：建立他莫昔芬誘導的KLF4基因敲除小鼠模型

2、，在成年小鼠腹腔內(nèi)注射他莫昔芬誘導KLF4基因敲除。使用免疫組織化學染色方法檢測KLF4敲除后小鼠皮膚組織的結(jié)構(gòu)變化。分離純化小鼠表皮細胞，通過流式細胞術(shù)檢測并比較野生小鼠與基因敲除組中毛囊隆突部干細胞（CD34CD49f細胞）和IFE干細胞（Sca1CD49f細胞）數(shù)量。通過體外克隆形成實驗，比較野生小鼠與基因敲除組中表皮細胞體外克隆形成能力，并使用免疫熒光激活細胞分選術(shù)（F）分離兩組表皮細胞中的CD34CD49f細胞，比較其體外克隆

3、形成能力。結(jié)果：結(jié)果：與對照野生小鼠相比，KLF4敲除小鼠的表皮組織內(nèi)毛囊顯著增生，基底細胞從單層增殖為多層。KLF4小鼠表皮細胞中CD34CD49f毛囊干細胞和Sca1CD49fIFE干細胞的比例分別為12.8%和68.73%，而KLF4小鼠表皮細胞中干細胞的比例分別降至6.26%和52.6%。體外克隆形成實驗顯示KLF4敲除后表皮細胞體外形成的克隆數(shù)目從22下降至9。此外，KLF4小鼠表皮CD34CD49f細胞體外能形成33個克隆，

4、但是在KLF4小鼠中這一數(shù)目降至15。結(jié)論：結(jié)論：KLF4敲除后表皮干細胞的數(shù)目減少，其自我更新能力下降，因此KLF4在表皮干細胞的維持中發(fā)揮著重要的角色。[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]表皮干細胞；KLF4基因敲除；增生；自我更新；克隆形成第三部分第三部分小鼠皮膚急性創(chuàng)傷愈合過程中表達小鼠皮膚急性創(chuàng)傷愈合過程中表達KLF4的表皮干細胞的表皮干細胞的作用的作用目的：目的：研究表達KLF4的表皮干細胞對小鼠皮膚急性創(chuàng)傷愈合的作用。方法：方法：利用KLF4