24363.磷酸化介導(dǎo)的ugt1a3代謝活性差異的初步研究

1、七七介導(dǎo)的UGTIA3門(mén)門(mén)代謝活‘‘.黔砂論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:論文評(píng)閱人1:評(píng)閱人2:評(píng)閱人3:陳樞青教授浙江大學(xué)藥學(xué)院詹金彪教授浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院鄭高利研究員浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院答辯委員會(huì)主席:委員委員沒(méi)浙江大學(xué)藥學(xué)院受浙江大學(xué)藥學(xué)院受浙江大學(xué)藥學(xué)院答辯日期:2011年3月浙江大學(xué)碩士學(xué)位論磷酸化介導(dǎo)的UGTIA3代謝活性差異的初步研究專業(yè):2008級(jí)碩士研究生:導(dǎo)師:藥物分析學(xué)姚艷曾蘇教授摘要蛋白質(zhì)磷酸化是最常見(jiàn)、最重要的一種蛋白翻

2、譯后加工，是生物體內(nèi)重要的共價(jià)修飾方式之一。它由兩個(gè)作用相反的酶系一磷酸酶和激酶進(jìn)行調(diào)控。其中，蛋白激酶e(proteinkinasee，PKe)是一類(lèi)eaZ、磷脂依賴性的蛋白激酶，催化多種蛋白質(zhì)上serThx磷酸化，在跨膜信號(hào)傳遞過(guò)程中起著重要作用。已有的研究表明，磷酸化作用對(duì)uGT酶的活性以及底物的選擇性都會(huì)產(chǎn)生重要的影響。對(duì)于多數(shù)uGTIA亞型而言，只有在一定磷酸化修飾下，蛋白酶才表現(xiàn)出較好的底物催化活性，且這種磷酸化作用多數(shù)受蛋

3、白激酶c(PKc)的調(diào)控。在此基礎(chǔ)上，本課題從分子水平對(duì)磷酸化與uGTIA3活性的關(guān)聯(lián)機(jī)制進(jìn)行探討。應(yīng)用分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)，通過(guò)有完備翻譯后修飾功能的Bac一to一Bac昆蟲(chóng)系統(tǒng)建立高效表達(dá)人uGTIA3的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系采用磷酸化抑制劑姜黃素和鈣感光蛋白一c分別作用于s份細(xì)胞，考察表達(dá)得到的uGTIA3重組酶對(duì)榭皮素的代謝變化，從而探究磷酸化對(duì)uGTIA3活性的調(diào)控，以及這種調(diào)控是否是通過(guò)PKc引起的。1人uGTIA3蛋白在sfg細(xì)胞中的