蘋(píng)果果實(shí)中糖代謝酶的可逆磷酸化修飾及其活性調(diào)控.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定外源ATP對(duì)蘋(píng)果果實(shí)內(nèi)糖代謝酶的活性影響,初步確定了幾種可能受蛋白可逆磷酸化調(diào)節(jié)的酶:蔗糖磷酸合酶、蔗糖合酶(兩具催化方向)、淀粉糖.通過(guò)外加蛋白激酶和蛋白磷酸酶的抑制劑,然后再測(cè)定初步篩選出的酶的活性,進(jìn)一步證明果實(shí)細(xì)胞體系內(nèi)可能存在對(duì)糖代謝酶的共價(jià)調(diào)節(jié)機(jī)制,并對(duì)參與調(diào)節(jié)的種類(lèi)和特性進(jìn)行初步判斷.脫落酸(ABA)是一種具有重要生理功能的植物激素.許多研究表明ABA在果實(shí)成熟中起到重要作用,糖卸載也受到激素(特別是ABA)

2、的調(diào)控.該實(shí)驗(yàn)通過(guò)使用不同濃度的ABA對(duì)果實(shí)圓片進(jìn)行活體溫育,測(cè)定各種糖代謝酶的活性變化,來(lái)確定ABA是否對(duì)蘋(píng)果中糖代謝酶的活性具有調(diào)節(jié)作用.為了驗(yàn)證在ABA誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中是否有蛋白磷酸化反應(yīng)的參與,該實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)20μmol/LABA處理的酶提取液進(jìn)行堿性磷酸酶處理,發(fā)現(xiàn)酸性轉(zhuǎn)化酶和蔗糖合酶(分解方向)的活性繼續(xù)顯著增加.加入蛋白激酶抑制劑后,結(jié)果與此相同,表明細(xì)胞內(nèi)的脫磷酸化作用有助于酶活性的提高.蛋白磷酸酶抑制劑的作用效果無(wú)規(guī)