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1、細(xì)胞極性是指細(xì)胞形態(tài)、蛋白質(zhì)分布以及細(xì)胞功能的不對(duì)稱(chēng)性。幾乎所有的真核細(xì)胞都具有極化現(xiàn)象。極化的上皮細(xì)胞都有明顯的質(zhì)膜功能域:頂膜與底膜,這是上皮細(xì)胞中蛋白質(zhì)與脂類(lèi)極性運(yùn)輸?shù)慕Y(jié)果。胃壁細(xì)胞是典型的極化上皮細(xì)胞,負(fù)責(zé)胃酸及內(nèi)因子(Intrinsic factor)的分泌。胃壁細(xì)胞的酸分泌不僅具有重要的生理學(xué)功能,同時(shí)亦為研究cAMP依賴(lài)性的胞吐(Exocytosis)提供了不可多得的模式系統(tǒng)。 胃酸分泌是一個(gè)精細(xì)調(diào)節(jié)的生理過(guò)程,受
2、內(nèi)分泌、旁分泌以及神經(jīng)刺激所調(diào)控。眾所周知,組胺刺激所引發(fā)的磷酸化事件將導(dǎo)致壁細(xì)胞內(nèi)質(zhì)子泵H<'+>,K<'+>-ATPase的轉(zhuǎn)位以及細(xì)胞骨架的重排,最終將質(zhì)子從壁細(xì)胞中排出。 Ezrin是ERM(Ezrin-Radixin-Moesin)這個(gè)細(xì)胞膜/骨架聯(lián)接蛋白家族的成員。ERM家族的成員調(diào)控地連接著膜蛋白與細(xì)胞骨架,并且參與細(xì)胞骨架組建和信號(hào)傳導(dǎo)通路。Ezrin位于泌酸細(xì)胞的頂膜,參與耦連cAMP蛋白激酶激活與壁細(xì)胞的酸分
3、泌。我們最近的研究鑒定出PKA介導(dǎo)的Ezrin第66位絲氨酸的磷酸化并且確定了該磷酸化位點(diǎn)在壁細(xì)胞活化中的功能。我們利用生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的Ezrin結(jié)合蛋白質(zhì)WWOX,WWOX含有兩個(gè)WW結(jié)構(gòu)域,是一個(gè)潛在的腫瘤抑制基因。我們的生化研究發(fā)現(xiàn)Ezrin第66位絲氨酸的磷酸化狀態(tài)通過(guò)改變Ezrin的構(gòu)象調(diào)控著Ezrin-WWOX之問(wèn)的相互作用。系統(tǒng)研究揭示Ezrin-WWOX之間的相互作用是通過(guò)Ezrin羧基端的PPVY序列與WWO
4、X的第一個(gè)WW結(jié)構(gòu)域相互結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)的。我們的定點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)Ezrin的Tyrosine 477為Ezrin-WWOX相互作用所必須。鑒于Tyrosine477是酪氨酸激酶Src的一個(gè)底物,我們的實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步表明Src和PKA介導(dǎo)的磷酸化可以通過(guò)調(diào)控Ezrin與WWOX的相互作用來(lái)改變細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)特征。我相信:通過(guò)生物光子學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)的綜合與交叉,我們會(huì)在不久的將來(lái)在納米水平闡明Ezrin的分子動(dòng)力學(xué)特征及其可塑性的物
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