25696.魚類kisspeptin與gnih信號(hào)系統(tǒng)的鑒定及其在生殖調(diào)控中的作用研究

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文魚類kisspeptin與gnih信號(hào)系統(tǒng)的鑒定及其在生殖調(diào)控中的作用研究姓名：李水生申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：林浩然20100608李水生中山人學(xué)博I：學(xué)位論文2010年6月同線性結(jié)構(gòu)；根據(jù)預(yù)測(cè)出來(lái)的序列，我們?cè)诎唏R魚中克隆了gnih基因以及三個(gè)潛在的gnih受體基因(gnihrl、gnihr2、gnihr3)的cDNA序列全長(zhǎng)。同源比對(duì)結(jié)果顯示：GnIH的氨基酸序列在不同物種中存在較大的差異。Gnl

2、H受體的序列同源比對(duì)和進(jìn)化樹分析都表明斑馬魚三個(gè)gnihrs屬于gnih的受體。組織表達(dá)模式研究顯示：gnih與gnihrs主要在斑馬魚腦中表達(dá)，提示它們的作用區(qū)域主要在腦區(qū)。此外，我們還研究了gnih與gnihrs在斑馬魚胚胎發(fā)育過程的表達(dá)變化。gnih的表達(dá)在5原基期首次被檢測(cè)到，之后一直維持在相對(duì)恒定的水平；而三個(gè)gnihrs在整個(gè)胚胎和早期發(fā)育過程都有表達(dá)。3運(yùn)用realtimePCR方法，我們檢測(cè)了kisses、gpr54s、

3、gnih與gnihrs在斑馬魚青春期發(fā)育過程中的表達(dá)變化。兩個(gè)kiss基因在青春期啟動(dòng)前表達(dá)開始上升，但它們的表達(dá)模式又有所不同；而兩個(gè)gpr54s的表達(dá)模式呈現(xiàn)互補(bǔ)的趨勢(shì)；提示它們?cè)谇啻浩诎l(fā)育的過程中可能具有不同的功能。gnih與gnihrl的表達(dá)在斑馬魚青春期發(fā)育過程中沒有顯著變化，而gnihr2，gnihr3在卵黃生成中期顯著升高，其中的分子機(jī)制目前還不是很了解。4通過化學(xué)合成金魚kisspeptins與斑馬魚gnih的核心肽，在

4、體注射成熟的雌性金魚，發(fā)現(xiàn)kissl能顯著刺激金魚LH的分泌，而kiss2不能；在較高劑量，gnih亦能有效地抑制金魚LH的分泌。然而，在離體實(shí)驗(yàn)中，2種kisspeptin與gnih對(duì)金魚垂體細(xì)胞LH的分泌均沒有顯著的影響，提示kisspeptins與gnih對(duì)金魚的LH調(diào)控可能發(fā)生在下丘腦水平。5通過切除金魚的卵巢，運(yùn)用realtimePCR檢測(cè)下丘腦kissl、kiss2與gnih的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)：卵巢切除后下丘腦kissl基因的