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1、福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文人乳酸脫氫酶C4結(jié)構(gòu)的生物信息學(xué)研究及其L178X突變體表達(dá)載體的構(gòu)建姓名:顏水堤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):臨床檢驗(yàn)診斷指導(dǎo)教師:蘭風(fēng)華20100301福建醫(yī)科大學(xué)2007級(jí)研究生畢業(yè)論文BioinformaticstudyonthestructureofhumanlactatedehydrogenaseC4andconstructionofrecombinantvectorsfortheexpressionoft
2、heL178XmutantAbstractSperm—specificlactatedehydrogenase,generallyconsistingoffourcopiesofsubunitC,isalsocalledlactatedehydrogenaseC4,orLDH—C4Beingakeyenzymeforspermenergymetabolism,itiscloselyrelatedtospermatogenesis,spe
3、rmaticmetabolismandspermcapacitationWefoundanonsensemutationL178XintheprocessofthestudyoftherelationshipbetweenLDHCgenemutationandmaleinfertilityTostudytheinfluencesofpreciouslyfoundL178Xmutationonthestructureandfunction
4、ofLDH—C4,ITASSERwasusedtopredictthestructureandfunctionofLDH—C4WefoundthatbothLDHC4andsomaticLDHbelongtoLHD一1enzymefamily,sharingmostoftheconserverdaminoacidsMeanwhile,threebasiccharacteristicswerefound麗thLDH1enzymefamil
5、y:NADbindingsite,substratebindingsite,aswellasinterfaceofLDHCsubunitBasedontheanalysisabove,wepreparedaprokaryoticexpressionvectorpET28a()一hLDHC/L178X,andfoundthattheL178XmutanthadnoLDHactivityFurthermore,weconstructedae
6、ukaryoticexpressionvectorpVAX1一hLDHC/L178Xtoperformtranscription/translationassayinvitrotoaccesstheactivityofthewildtype,heterozygousL178XmutantandhomozygousL178XmutantofLDH—C4Wefoundthattheactivityofthewild—typeLDHC4was
7、twiceaStheheterozygoteInaword,ourstudieslayafoundationforilluminatingtheinfluenceoftheLDHCgenemutationonthefunctionofLDH—C4Keywords:spermspecificlactatedehydrogenase;LDH—C4;NADbindingsite;substratebindingsite;genemutatio
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