大豆PEP羧化酶反義基因的克隆和載體構(gòu)建.pdf_第1頁(yè)
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1、該研究克隆了大豆PEP羧化酶基因的部分序列,構(gòu)建了含有大豆PEP羧化酶的反義基因雙元載體Dantip和發(fā)夾結(jié)構(gòu)的載體Dpip.利用攜帶雙元載體p3301(含有GUS報(bào)告基因和卡那霉素抗性基因NPTⅡ)的根癌農(nóng)桿菌菌株LBA4404,以GUS基因瞬時(shí)表達(dá)效果為指標(biāo),優(yōu)化了百脈根的農(nóng)桿菌侵染條件.以較優(yōu)化的轉(zhuǎn)化體系,將農(nóng)桿菌EH105攜帶的反義PEP羧化酶基因采用共培養(yǎng)法導(dǎo)入百脈根,經(jīng)PCR檢測(cè)和再生植株的抗性檢測(cè),初步認(rèn)定獲得了轉(zhuǎn)化植株,

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