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文檔簡介
1、油菜是最重要的油料作物之一，也是我國的主要經(jīng)濟作物，在國民經(jīng)濟中占有重要地位。其油主要食用，其餅粕主要用于飼料。近年來人們對油菜的品質(zhì)不斷改良，并且菜籽油也大量應(yīng)用于化工、能源領(lǐng)域，轉(zhuǎn)基因油菜也用來生產(chǎn)生物柴油的原料等。由于油菜用途的不斷拓展，對其研究也不斷深入。近年來，利用基因工程手段，提高種子的含油量，增加其經(jīng)濟價值，成為研究的重要目標。 丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白質(zhì)/油脂含量比例的一個關(guān)鍵酶，抑制PEP基因的表達
2、，可提高種子的含油量。本研究利用PCR．法從甘藍型油菜花油5號(H045)克隆了PEP基因片段，與種子特異性表達載體pBI421-B構(gòu)建了反義PEP基因的種子特異性植物表達載體，；并以甘藍型油菜花油5號(H045)為材料，利用激光微束穿刺法將其轉(zhuǎn)化到甘藍型油菜中，通過卡那抗性和PCR．方法鑒定，獲得了轉(zhuǎn)基因植株。本研究利用激光微束穿刺法將外源基因成功導(dǎo)入油菜中，克服了油菜農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化存在的眾多問題，諸如轉(zhuǎn)化頻率低，重演性差，基因型限制等，
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