雞γ干擾素基因的克隆和表達(dá)及其多克隆抗體的制備.pdf_第1頁(yè)
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1、γ-干擾素(Interferon-γ,IFN-γ)主要由活化的T細(xì)胞及NK細(xì)胞產(chǎn)生,具有抗病毒作用,也具有上調(diào)MHCⅡ(major histocompatibility complex,MHC)類抗原分子的表達(dá)等作用,是影響機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)的一類具有多種調(diào)節(jié)效應(yīng)的細(xì)胞因子.該試驗(yàn)根據(jù)國(guó)外已發(fā)表的序列,設(shè)計(jì)一對(duì)引物,應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse transcription-polymerase chain reac

2、tion,RT-PCR)技術(shù),從刀豆素A(Concanavalin A,Con A)誘導(dǎo)培養(yǎng)24h的雞脾淋巴細(xì)胞中擴(kuò)增得到了大小約500bp的基因,將其連接到pUC19質(zhì)粒上,經(jīng)質(zhì)粒PCR和EcoR I、HinDⅢ雙酶切鑒定后,篩選陽(yáng)性重組克隆.序列分析表明,該基因閱讀開放框架由492個(gè)核苷酸組成,與馬和人IFN-γ基因序列的同源性分別為35﹪和32﹪,與雞Ⅰ型干擾素基因的同源性僅為15﹪,與國(guó)外報(bào)道的雞IFN-γ基因序列完全一致.這表

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