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1、東北農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文東北玉米自交系Bt基因遺傳轉(zhuǎn)化的研究姓名:侯艷華申請學位級別:碩士專業(yè):植物學指導教師:徐仲2003.5.1東北農(nóng)業(yè)大學理學硬士學位論文StudyonthegenetiCtransformationofBtgeneintomaizeinbredlinesinNortheastMaizeWaSallimportantgraincropsandforagecrops,itwasalsoamodemfoodindus時
2、andanimportantnIWmaterialofmedicalandchemicalindosArysoeachcountrypaledmoreattentiontoit’Sgenetictransformation,Owingtothecoflnementofthehostofagrobactrinmtumefliensandthedifficultiesofthemaizeinbredlinesforobtainingembr
3、yogeniccaili,thegeneticsystemofmaizeWash’tidealenoughInthisexperiment,theimmatureembryoswereused硒explanttoinducecalliandBtgenewastranferedintoM017、81162、Ji846and7922bytheAgrobactriummediatedWehavegainedthepositiveplantsd
4、eterminedbyPCRMeanwhilethemajorfactorsinfluencingtheregenerationsystemandtransformationsystemforagrobactedummediatedmethodwereoptimizedThemainresultswereshowedasfolloMng:1InductionofembryogeniccalliWasinheritableDitieren
5、tmaizegenotypesshoweddifferentabilityofemberyogeniccalliestabilishmentandplantregenerationM017、Ji846、81162and7922hadthemosthi【gIIrateofinduction,Ye107、5416and444werehigh,butLongKangllandDongNon946hadlittlerateofit;Thecon
6、centrationof24一Dhadanenfluenceonthem0pha’growthanddifierentiationofcalliOnthewhole,2mg凡24一DwasfoundtobemostfavorablefortheinductionofembryogeniccallliButthesensitivityto2,4一Dvariedamonggenotypes,M017and5416need3mg/L24一Di
7、nthecourseofjnduction2TheresisteoceoftransformatorswereselectedbyG418afterCOculturewithagrobactriumtumeflienwhichWas40meCLinsubculturedmediumand50mg/LindiffereniatedmediumIntheprocessofkillingagrobactrium,CefAmporCarbwer
8、ealsousefulandthetimeofinhibitionWaslongtooAstheconcentrationofthreeantibioticWas50mg/L,300mg/L,400mg/LrespectivelyWechose50mg/LCarbasantibiotic3Thefactorsinfluencingthetransformationcfficiencyforagrobacteriummedialedmet
9、tIodsweremainlystudiedthepreculture,theconcentrationofagrobacterium,thetimeofirifectionandtheeffectofASTheefrectofthedaysofprecultureontherateoftransformationhadnonotabledifference;Thee搦ciencyoftransformationwashi【ghwhen
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