根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)馬鈴薯蛋白酶抑制劑基因PI-Ⅱ轉(zhuǎn)化秈稻的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究應(yīng)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)水稻遺傳轉(zhuǎn)化體系,將馬鈴薯蛋白抑制劑基因PI-Ⅱ?qū)攵i稻品種粵香占和T461,最后獲得T461轉(zhuǎn)基因株系75個(gè),113棵單株.主要結(jié)果如下:(1)根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)秈稻的遺傳轉(zhuǎn)化存在明顯的基因型依賴性,T461抗性愈傷組織在不同的分化培養(yǎng)基上均能分化成苗,但粵香占的抗性愈傷組織則極難分化,未能獲得轉(zhuǎn)化株系.(2)不同的菌株轉(zhuǎn)化T461時(shí),轉(zhuǎn)化效率存在很大差異,在所獲得的75個(gè)轉(zhuǎn)基因株系中,有73個(gè)株系由超毒力菌株EHA1

2、05介導(dǎo)得來,轉(zhuǎn)化率大于10﹪,另有2個(gè)株系由普通型菌株LBA4404介導(dǎo)得來,轉(zhuǎn)化率僅為1.5﹪.(3)不同的篩選次數(shù)對T461抗性愈傷組織分化率影響很大,只經(jīng)過一輪篩選的抗性愈傷組織分化率高達(dá)50﹪,而經(jīng)過兩輪篩選的抗性愈傷組織分化率只有14.3﹪,主要原因可能是長期選擇繼代培養(yǎng)引起部分抗性愈傷組織分化能力的喪失,導(dǎo)致分化率下降.(4)PCR結(jié)果表明在108棵所檢測的轉(zhuǎn)基因植株中有101株含有目的基因PI-Ⅱ的特異性片段,陽性率為9

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