荔枝多酚的提取制備和抗氧化活性研究.pdf

1、我國(guó)荔枝資源豐富,目前栽培面積57萬(wàn)公頃,年產(chǎn)荔枝150萬(wàn)噸左右,居世界第一位。荔枝殼約占鮮果重的15％,含有大量多酚類(lèi)物質(zhì),具有很強(qiáng)的抗氧化活性。本文以荔枝殼為實(shí)驗(yàn)原料,系統(tǒng)的研究了荔枝多酚的提取制備工藝,并建立了荔枝多酚的高效液相色譜分析的分離條件,最終對(duì)其體外抗氧化活性和急性毒性進(jìn)行探討。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 ⑴為優(yōu)化荔枝多酚提取工藝,在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面法建立了荔枝多酚提取方法的二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型,結(jié)果所得

2、最佳提取條件為液料比13:1,乙醇溶液濃度64％,浸提時(shí)間78 min并浸提一次。在此條件下實(shí)測(cè)提取液中荔枝多酚含量為(1.184±0.009)mg/mL(N=3),與理論值1.208mg/mL誤差僅為1.97％,說(shuō)明該二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型可靠。
　　 ⑵靜態(tài)吸附解吸和動(dòng)態(tài)吸附解吸實(shí)驗(yàn)表明,大孔吸附樹(shù)脂XDA-7對(duì)荔枝多酚具有良好的吸附和解吸性能。荔枝多酚粗提物柱層析最佳純化條件為:上樣液濃度為3.5 mg/mL,樣液pH為4.5,

3、上樣速率為2 BWh,洗脫液濃度60％,洗脫速率6 BV/h。以此優(yōu)化條件進(jìn)行純化,所得產(chǎn)品純度為70.65％,純化效果較理想。
　　 ⑶建立了荔枝多酚高效液相色譜分析的分離條件,所得最佳色譜條件為:選用symmetryC18色譜柱(4.6×150 mm,5μm)、,流動(dòng)相A為1.5％甲酸水溶液,流動(dòng)相B為乙腈-水-甲酸(80∶18.5∶1.5,v/v/v)混合液,梯度程序:(min/B％):0/1,3/3,6/8,0/3,15

4、/12,25/19,35/21.5,50/45,紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm,流速1 mL/min,柱溫30℃,進(jìn)樣量20μL;在此條件下對(duì)荔枝多酚進(jìn)行分析,可獲得較好的分離效果,并能在35分鐘內(nèi)完成一次分析。同時(shí)對(duì)荔枝多酚中的(-)-表兒茶素和蘆丁進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明兩成分的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.14％-4.91％之間,線(xiàn)性范圍在0.0125-0.2 mg/mL之間,回歸方程的相關(guān)系數(shù)r為0.9996-0.9999,其含量分別為31.84

5、 mg/g和1.326 mg/g。
　　 ⑷荔枝多酚對(duì)DPPH自由基、超氧陰離子自由基和羥自由基均具有較好的清除作用,清除活性和劑量之間呈現(xiàn)出量效關(guān)系。荔枝多酚對(duì)三種自由基的半抑制濃度分別為7.36 mg/L、16.09 mg/L和65.20 mg/L,總抗氧化能力為74.99 U/mg,表明荔枝多酚具有較強(qiáng)的抗氧化活性。
　　 ⑸荔枝多酚的急性毒性實(shí)驗(yàn)表明,腹腔注射給藥半數(shù)致死量LD50為0.2512g/kg,95％可