4株鴨坦布蘇病毒在不同宿主細(xì)胞中增殖情況的比較以及SX株的全基因組測(cè)序分析.pdf

1、鴨坦布蘇病毒是2010年以來(lái)引起我國(guó)種鴨和蛋鴨產(chǎn)蛋急劇下降的一種新病原，經(jīng)過(guò)對(duì)其理化特性和生物學(xué)特性研究表明，該病原是一種有囊膜的單股正鏈RNA病毒，基因組大小約為11kb，只包含一個(gè)大開(kāi)放閱讀框，編碼3個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和7個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白，屬于黃病毒科黃病毒屬恩塔亞病毒群。鴨坦布蘇病毒病首先發(fā)生于福建、浙江等地，逐漸傳播到江蘇、安徽、河南、山東、河北等主要鴨產(chǎn)區(qū)，主要表現(xiàn)為蛋鴨、種鴨產(chǎn)蛋大幅下降，后期伴有神經(jīng)癥狀，發(fā)病率高、傳染性強(qiáng)，給我國(guó)的養(yǎng)

2、鴨業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。鑒于此，本課題開(kāi)展了以下工作:
　　1.本研究從山東某地區(qū)2013年發(fā)病鴨群中分離到一株病毒，經(jīng)生物學(xué)特性分析、PCR擴(kuò)增、血清中和試驗(yàn)鑒定為鴨坦布蘇病毒，并命名為SX株。動(dòng)物回歸試驗(yàn)結(jié)果表明，該毒株對(duì)雛鴨的致死率高達(dá)100％，高于之前所分離毒株。
　　2.本研究對(duì)該分離株及其他幾個(gè)毒株在不同宿主細(xì)胞CEF、DEF、DF1、BHK-21、VERO、MDCK中的增殖情況進(jìn)行了比較，結(jié)果表明:所有毒株均

3、適于在DEF、BHK-21細(xì)胞上生長(zhǎng)，均可產(chǎn)生明顯的細(xì)胞病變;但在VERO細(xì)胞上需盲傳3代后才能適應(yīng)細(xì)胞，并產(chǎn)生明顯的細(xì)胞病變;在DF1細(xì)胞培養(yǎng)中，盡管沒(méi)有觀(guān)察到眼觀(guān)細(xì)胞病變，但RT-PCR方法可檢測(cè)到病毒的核酸，證明存在病毒的復(fù)制;新分離毒株SX對(duì)DEF、BHK-21、VERO細(xì)胞的適應(yīng)性要強(qiáng)于其他毒株;所有毒株均不能適應(yīng)CEF和MDCK細(xì)胞。
　　3.通過(guò)對(duì)分離毒株的全基因組進(jìn)行克隆、測(cè)序分析，發(fā)現(xiàn)測(cè)序毒株SX與其他鴨坦布蘇病