油菜蘿卜質(zhì)不良新恢復(fù)材料鑒定及恢復(fù)基因的傳遞分析.pdf

1、細(xì)胞質(zhì)雄性不育是油菜雜種優(yōu)勢(shì)利用的主要途徑和手段，而目前最具應(yīng)用前景的是蘿卜細(xì)胞質(zhì)不育體系。該系統(tǒng)的不育系育性穩(wěn)定，用來(lái)制種安全系數(shù)非常高，但其恢復(fù)基因僅存在蘿卜中，在恢復(fù)基因轉(zhuǎn)育時(shí)候會(huì)攜帶冗余的蘿卜的染色體片段，對(duì)油菜品質(zhì)與農(nóng)藝性狀均產(chǎn)生不利影響。20世紀(jì)90年代，法國(guó)通過(guò)原生質(zhì)體融合等方法成功育成油菜Ogura-INRA CMS不育系和恢復(fù)系，而且恢復(fù)基因所攜帶的蘿卜染色體片段得到進(jìn)一步縮短，實(shí)現(xiàn)了該系統(tǒng)雜交種的商業(yè)化生產(chǎn)。但該恢復(fù)

2、材料已申請(qǐng)了專利保護(hù)，限制了我國(guó)在蘿卜質(zhì)不育系統(tǒng)的研究和應(yīng)用發(fā)展。本文擬從其他途徑獲得、鑒定屬于我國(guó)的新型的蘿卜質(zhì)不育恢復(fù)材料，為國(guó)內(nèi)的Ogura-CMS應(yīng)用創(chuàng)造一個(gè)平臺(tái)。
　　 本研究主要采用的試驗(yàn)材料有CLR650、SR、YR、CR以及7-2140、7-2143、7-7302、7-7304、7-7311、7-7314等材料。為了鑒定恢復(fù)材料CLR650是否為新型Ogura CMS恢復(fù)材料，本研究采用了分子生物學(xué)的研究手段，包

3、括連鎖群分析和特異標(biāo)記分析的方法。為分析恢復(fù)材料CLR650的恢復(fù)基因的傳遞情況，利用細(xì)胞學(xué)觀察和花粉管萌發(fā)觀察的方法。研究結(jié)果主要有：⑴CLR650攜帶的恢復(fù)基因位于N19連鎖群。雖然國(guó)外同類(lèi)恢復(fù)材料的恢復(fù)基因也是位于N19連鎖群上，本研究中的恢復(fù)材料CLR650與國(guó)外同類(lèi)恢復(fù)源相比仍有差異，國(guó)外的恢復(fù)源的恢復(fù)基因獲得途徑均是來(lái)自原生質(zhì)體融合，其恢復(fù)功能也完全相同，恢復(fù)材料CLR650是通過(guò)有性雜交產(chǎn)生的，而且恢復(fù)基因的供體材料（蘿-

4、藍(lán)，Raphanobrassica，AACCRR，2n=58）也不相同。⑵通過(guò)蘿卜染色體上與恢復(fù)基因連鎖的分子標(biāo)記分析，CLR650與國(guó)外同類(lèi)恢復(fù)系的蘿卜染色體片段在較多位點(diǎn)上存差異。⑶CLR650的體細(xì)胞染色體數(shù)目穩(wěn)定到2N=38條。⑷CLR650轉(zhuǎn)育后代分離比不符合孟德?tīng)柗蛛x規(guī)律的現(xiàn)象，經(jīng)細(xì)胞學(xué)觀察推測(cè)可能是由于減數(shù)分裂染色體聯(lián)會(huì)、分離異常所致?；ǚ酃苊劝l(fā)實(shí)驗(yàn)中，恢復(fù)材料CLR650和對(duì)照材料的花粉管萌發(fā)狀況基本一致，因此恢復(fù)材料C