水稻類鈣調磷酸酶B亞基蛋白基因OsCBL6的功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、高等植物中已知的Ca2+傳感器主要有三類：鈣調素蛋白CaM(calmodulin)及其相關蛋白；鈣依賴型蛋白激酶CDPK(Ca2+-dependent protein kinases);類鈣調磷酸酶B亞基蛋白(Calcineurin B-like)。類鈣調磷酸酶B亞基蛋白的結構與動物的鈣調磷酸酶B調控亞基及神經元鈣離子傳感器相似,含有四個用于結合Ca2+的EF-手型結構域,并且能與一類絲/蘇氨酸蛋白激酶CIPK(CBL-interact

2、ing protein kinases)互作,通過CIPK蛋白激酶激活下游目標基固。 本研究以擬南芥AtCBL1基因序列為探針,對水稻(Oryza sativa L.)全基因組進行掃描,鑒定獲得一個水稻類鈣調磷酸酶B亞基蛋白基因OsCBL6,GenBank中的登錄號為DQ201200,定位于水稻第12染色體上。構建了pBI-OsCBL6-GFP瞬時表達載體,采用農桿菌介導法轉化洋蔥表皮細胞,結果表明OsCBL6-GFP定位于洋蔥

3、表皮細胞的細胞質中。將OsCBL6基因的ORF序列與表達載體pGEX-4T-2連接形成GST融合基因,使pGEX-4T-2-OsCBL6在大腸桿菌中較高效地表達,OsCBL6基因的表達能顯著提高了大腸桿菌對高鹽和滲透脅迫的耐受性。通過農桿菌介導的方法將OsCBL6基因轉化到煙草中,獲得10株轉基因陽性植株。將T0代轉基因煙草的葉盤用250 mM NaCl及15％PEG6000脅迫處理,轉基因植株與非轉基因植株之間的表型、葉綠素含量和電解

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