葡萄WRKY26、WRKY27基因啟動(dòng)子克隆及功能分析.pdf

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人承諾：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所取得的研究成果。論文中除特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含他人和其他機(jī)構(gòu)已經(jīng)撰寫或發(fā)表過的研究成果，其他同志的研究成果對本人的啟示和所提供的幫助，均己在論文中做了明確的聲明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：孛位論文版權(quán)的使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解遼寧師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，及學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交復(fù)印件或磁盤，允許論文被查閱和借閱。本文授權(quán)遼

2、寧師范大學(xué)，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫并進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，并且本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。保密的學(xué)位論文在解密后使用本授權(quán)書。學(xué)位論文作者簽名：社 指導(dǎo)教師虢壘重塹塑皇簽名日期： 如／；年如弓J 日葡萄W R K Y 2 6 、W R K Y 2 7 基因啟動(dòng)子克隆及功能分析C l o n i n g a n dF u n c t i o n a l A n

3、a l y s i s o f H t ／sv i n i f e ，口W R K Y 2 6 a n dW R K Y 2 7P r o m o t e r sA b s t r a c tE u r o p e a ng r a p e ( V ／t ／sv m i f e r a L ) a so n e o f t h em o s ti m p o r t a n t s p e c i e so f V i t i s ，i

4、 s u s e df o rt a b l eg r a p ea n dt h ew i n e ，a n di t s a n n u a lp r o d u c t i o n a c c o u n t sf o ra b o u t9 0 ％o f t h et o t a lp r o d u c t i o no f g r a p e si nt h e w o r l d ．B e c a u s eo f i t

5、 sp o o rs t r e s sr e s i s t a n ta b i l i t y ，V i t i s v i n i f e y aLi s v u l n e r a b l et ot h ei n j u r i e so f e n v i r o n m e n t a lc h a n g ea n di n s e c tp e s t s ．T h ey i e l da n dq u a l i

6、t ya r ed i f f i c u l t t ob em a i n t a i n e d ．T h er e s e a r c h e s s h o w e d t h a t , i nt h e p r o c e s so fp l a n t s ’s t r e s sr e s p o n s e ，t h eb i n d i n g a n dr e g u l a t i o n so f s p e

7、 c i f i ct r a n s c r i p t i o nf a c t o r st os t r e s sr e s i s t a n c eg e n ep r o m o t e r sr e g u l a t e dt h ee x p r e s s i o no ft h ed o w n s t r e a mg e n e s n o to n l yt e m p o r a l l y b u t

8、 a l s od i f f e r e n t i a l l y , t o i n c r e a s e t h e s t r e s s r e s i s t a n c e o fp l a n t s ．W R K Y p r o t e i n s a r e ak i n d o fp l a n t - s p e c i f i ct r a n s c r i p t i o nf a c t o r sf

9、 a m i l y ．M o s tr e s e a r c h s h o w e dt h a tt h eW R K Y p r o t e i n sc o u l dw i d e l yp a r t i c i p a t ei n v a r i o u sb i o t i ca n da b i o t i cs t r e s s d e f e n s e r e a c t i o n s ．T h e r

10、 e f o r e ，w es e l e c t e dt h et w o o f W R K Y g e n e s ( V v W R K Y 2 6 a n dV v W R K Y 2 7 ) o f H t i sv i n i f e r aL ．t oa n a l y s et h er e g u l a t i o na b i l i t yo ft h e i rp r o m o t e r s ．T h

11、 er e s u l t w i l lp r o v i d ea t h e o r e t i c a lf o u n d a t i o nf o rt h es t r e s sr e s i s t a n c er e s e a r c h o f t h e g r a p e s ．U s i n g t h em e t h o do f t h e 陰n sv i n i f e r aL ．jSw h o

12、 l eg e n o m es e q u e n c e sc o m p a r i s o n ，w es e l e c t e d a b o u t a1 5 0 0b ps e q u e n c e a t t h e u p s t r e a m o fi n i t i a t i o n c o d o na s t h et a r g e t o fa m p l i f i c a t i o n ．A

13、c c o r d i n g t ot h e i n f o r m a t i o n i nt h eg e n o m e s e q u e n c e s w e d e s i g n e dt h ep r i m e r sa n do b t a i n e d t h ep r o m o t e rs e q u e n c e so fV v W R K Y 2 6 ( 1 1 0 8b p ) a n d

14、陽，W R K Y 2 7 ( 1 3 8 1b p )a m p l i f i e db y P C R ．T w op r o m o t e r s w e r ea n a l y z e d f o rp l a n t g e n ep r o m o t e r s ’c i s ·e l e m e n tb yu s i n g o ft h ea n a l y t i cd a t a b a s eP

15、 l a n t C A R E ．T h e r e s u l t ss h o w e d t h a tV v W R K Y 2 6 a n d1 4 , W R K Y 2 7 c o n t a i nav a r i e t yo fr e s p o n s e e l e m e n t s w h i c hi n v o l v e d i n p l a n td e v e l o p m e n ta n

16、d b i o t i c o r a b i o t i cs t r e s s e s ，s u c ha sh o r m o n a lr e s p o n s ed e m e n t ，s a l i c y l i ca c i dr e s p o n s ee l e m e n t ，j a s m o n i ca c i dr e s p o n s e e l e m e n t ，l i g h t s

17、e n s i t i v e r e s p o n s e e l e m e n t ，h e a t s e n s i t i v e r e s p o n s e e l e m e n ta n de n d o s p e r md e v e l o p m e n tr e l a t e dr e s p o n s e e l e m e m ，e ta 1 ．A c c o r d i n gt ot h e