農(nóng)桿菌介導(dǎo)大豆未成熟子葉節(jié)遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)錄因子GmPTF1在大豆中的表達(dá).pdf

1、以冀豆12的未成熟種子作為外植體，研究了6-BA濃度、取材時(shí)間、發(fā)育程度對(duì)不定芽誘導(dǎo)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，大豆未成熟胚子葉節(jié)的最優(yōu)再生條件是當(dāng)豆莢種子發(fā)育到最大(開花后60-66d)，豆莢開始由綠變黃時(shí)，在6-BA濃度在1.0～1.5mg/L條件誘導(dǎo)下，出芽率最高，達(dá)到了96.67％～100％，子葉節(jié)平均出芽數(shù)為1.6～2.57個(gè)。
　　 以冀豆7的未成熟子葉節(jié)為外植體做遺傳轉(zhuǎn)化研究，探討了外植體的低溫預(yù)處理、共培養(yǎng)溫度、共培養(yǎng)

2、基pH值對(duì)轉(zhuǎn)化效率的影響。結(jié)果表明，在開花60d左右，籽粒發(fā)育到最大，產(chǎn)生的抗性芽較多；對(duì)外植體4℃預(yù)處理降低了抗性芽數(shù)；共培養(yǎng)溫度為24℃、培養(yǎng)基pH值為6.6和24h光照條件下抗性芽產(chǎn)生率高。豫豆22、冀豆7、品系12的平均抗性芽數(shù)較高，到達(dá)2.11-2.18個(gè)。
　　 利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)大豆子葉節(jié)遺傳轉(zhuǎn)化法將轉(zhuǎn)錄因子基因GmPTF1導(dǎo)入大豆品種豫豆22，得到了11個(gè)T1代的(GmPTF1轉(zhuǎn)基因株系。通過熒光定量PCR檢測(cè)G

3、mPTF1在轉(zhuǎn)基因植株的表達(dá)以及測(cè)定轉(zhuǎn)基因植株和未轉(zhuǎn)基因植株在低磷脅迫條件下的形態(tài)和生理生化表現(xiàn)差異，分析GmPTF1基因在導(dǎo)入大豆后發(fā)揮的生物學(xué)功能。結(jié)果表明：轉(zhuǎn)基因植株的GmPTF1表達(dá)量明顯高于未轉(zhuǎn)基因?qū)φ沾蠖?，其中以T1-32和T1-40為最高。在低磷脅迫下，轉(zhuǎn)基因大豆的根系長(zhǎng)度、根表面積、根體積、葉面積、光合色素含量、磷吸收速度及葉片磷含量都顯著高于未轉(zhuǎn)基因?qū)Υ蠖?，而丙二醛含量顯著低于未轉(zhuǎn)基因大豆，表明轉(zhuǎn)基因植株的耐低磷能力要