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文檔簡介
1、膽固醇調節(jié)元件結合蛋白(sterolregulatoryelementbindingproteins,SREBPs)SREBPs和cAMP反應元件結合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein)CREB-1是體內重要的轉錄因子,SREBPs主要調控脂肪酸和膽固醇合成,CREB-1有著更為廣泛的作用。SREBPs家族有三種SREBP蛋白:SREBP-1a、SREBP-1c和SREBP-2。在人上,SREBP-
2、2由22號染色體上的基因編碼。SREBP-1a和SREBP-1c來自17號染色體上的同一基因,由于對這一基因的啟動子選擇不同而產生兩個不同的第一外顯子,但其余外顯子相同。SREBP-1,2的功能各有側重,SREBP-1c傾向于激活脂肪酸的合成,SREBP-2傾向于激活膽固醇的合成。SREBP-1a是組成型表達,但是能作用于所有含有SRE位點的基因。本研究成功獲得了豬SREBP-2的部分編碼序列和CREB-1的全編碼序列。豬SREBP-2
3、與人和中國倉鼠SREBP-2的核苷酸序列的同源性分別是86.4%和90.9%;CREB-1與人和家鼠的CREB-1的核苷酸序列的同源性分別是95.1%和96.8%。對已經公布的SREBP-1c序列也進行了分析,SREBP-1c與人和家鼠的SREBP-1c核苷酸序列的同源性分別是88.5%和78.8%.可見在進化中,這三個基因都是非常保守的。采用輻射性雜交板技術,將SREBP-2定位在豬的五號染色體末端。實驗結果與人豬比較基因圖譜的結果一
4、致。通過半定量PCR的方法,以β-actin基因為內參,對SREBPs和CREB-1在梅山豬的十個不同組織的分布情況進行了研究。實驗結果顯示三個基因都是廣泛表達的,其中SREBP-1在脂肪組織表達水平最高,SREBP-2在肝臟組織表達量最高,而CREB-1主要傾向于在腦組織表達。在豬的主要脂質生成器官——脂肪組織中,SREBP-1的表達量高于SREBP-2。 此外,利用基因轉染和藥物刺激的方法,對SREBPs的表達調控進行了研究
5、。用β興奮劑刺激COS7細胞系后發(fā)現(xiàn)CREB-1表達量上升,SREBPs的表達水平下降,特別是主要和脂質合成相關的SREBP-1表達下降十分明顯。實驗表明β興奮劑是通過SREBPs因子,特別是通過SREBP-1來達到抑制脂肪酸合成的作用。CREB-2是激活因子CREB-1的天然抑制劑,通過阻止CREB-1與共轉錄因子CREB結合蛋白(CREBBindingProtein,CBP)的結合達到抑制效果。發(fā)現(xiàn)在轉染CREB-2的293T細胞系
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