豬IRS-I基因的克隆、染色體精細(xì)定位與SNP檢測.pdf

1、該研究將其選為候選基因,在豬中開展研究.通過克隆、定位豬IRS-1基因,并搜尋其中蘊(yùn)藏的單核苷酸多態(tài)位點,為進(jìn)一步研究豬肌肉生長發(fā)育的分子機(jī)理打下基礎(chǔ),同時也為以豬作為二型糖尿病分子機(jī)理研究的動物模型做了鋪墊.主要研究結(jié)果如下:⒈采用同源比較克隆的策略,比較人與小鼠胰島素受體底物I基因的序列,以RT-PCR技術(shù)為手段,分8段逐段擴(kuò)增IRS-1基因以構(gòu)建重疊群,通過序列拼接獲取了長3756bp,覆蓋95﹪基因編碼區(qū)的豬IRS-1基因序列.

2、⒉運用輻射雜種板技術(shù)對豬IRS-1基因進(jìn)行染色體區(qū)域精細(xì)定位.兩點分析結(jié)果顯示,豬IRS-1基因與微衛(wèi)星標(biāo)記SW315緊密連鎖(LOD值為7.65),據(jù)此將豬IRS-1基因定位于SSC15q25.⒊參照人IRS-1基因的研究結(jié)果,從豬IRS-1基因序列中選取兩個包含重要SNP位點的片段進(jìn)行SNP掃描,搜索潛在的SNP位點.應(yīng)用單鏈構(gòu)象多態(tài)性與測序相結(jié)合的方法在杜洛克豬群體(42頭)與藏豬群體(28頭)中篩選到兩個SNP位點:一個位于26