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1、家兔作為一種小型的草食家畜,斷奶后家兔的腸道健康依賴于日糧中木質(zhì)纖維素的水平和品質(zhì)。但是在同一ADF水平下,由于DgF的水平不同,斷奶后家兔的腸道健康狀況也會(huì)發(fā)生很大變化。本課題通過研究不同DgF/ADF水平日糧對(duì)35~70日齡新西蘭肉兔生產(chǎn)性能、消化道酶活和盲腸菌群多樣性的影響,以更微觀、現(xiàn)代的微生態(tài)分子生物學(xué)技術(shù)的手段評(píng)價(jià)家兔盲腸菌群的演替規(guī)律,為確定家兔日糧中適宜的DgF/ADF水平提供理論依據(jù)。
選擇192只健康、
2、體重基本一致的35日齡新西蘭肉兔仔兔隨機(jī)分為4組,分別飼喂飼喂DgF/ADF水平分別為1.1、1.3、1.5、1.7的飼糧至70日齡結(jié)束。測(cè)定新西蘭肉兔盲腸淀粉酶、胰蛋白酶、纖維素酶的活性以及盲腸菌群多樣性。結(jié)論如下:
(1)不同DgF/ADF水平日糧對(duì)70日齡家兔體重影響不顯著(P>0.05),但對(duì)于不同DgF/ADF比值各組70日齡家兔平均日采食量、平均日增重和料重比影響顯著(P<0.05)。試驗(yàn)中隨著日糧DgF/AD
3、F比值的增大,平均日采食量也在增大:平均日增重隨著DgF/ADF比值的增大先增加后降低;料重比隨著DgF/ADF比值的增大,先降低后升高。試驗(yàn)中當(dāng)DgF/ADF=1.3時(shí),料重比最小,平均日增重最大,分別為4.17:1和28.63g。
(2)不同DgF/ADF水平日糧對(duì)消化道酶活影響顯著(P<0.05)。淀粉酶活性以處理組Ⅰ為最高,為15.82U/g,處理組Ⅳ最低,為13.65U/g,各處理組之間差異顯著(P<0.05):
4、胰蛋白酶活性隨著日糧中DgF/ADF比值的增大有先增加后降低的趨勢(shì),呈曲線變化;纖維素酶活隨著日糧中DgF/ADF比值增大而降低,各處理組之間差異顯著(P<0.05),其中處理組Ⅰ的纖維素酶活性最高,為33.43U/g,日糧中DgF/ADF比值影響家兔盲腸纖維素酶活性。
(3)不同DgF/ADF水平日糧顯著影響盲腸菌群多樣性。本實(shí)驗(yàn)用PCR-DGGE技術(shù)跟蹤120只斷奶仔兔盲腸菌群區(qū)系的演變,構(gòu)建不同DgF/ADF水平日糧
5、條件下的新西蘭肉兔35~70日齡的16SrDNA克隆庫(kù),分析匹配于DGGE優(yōu)勢(shì)譜帶16個(gè)克隆的16SrDNA序列。結(jié)果表明,DGGE圖譜由簡(jiǎn)單(斷奶)到復(fù)雜(56日齡),再回復(fù)簡(jiǎn)單(63日齡)到復(fù)雜(70日齡),最后趨于穩(wěn)定。Ⅰ、Ⅱ組35日齡DGGE圖譜最為相似,最優(yōu)勢(shì)譜帶為大腸桿菌;70日齡Ⅱ圖譜復(fù)雜,大腸桿菌存在但不是最優(yōu)勢(shì)譜帶,斷奶后圖譜的相似性低,不同DgF/ADF水平日糧導(dǎo)致了盲腸菌群區(qū)系結(jié)構(gòu)的顯著變化,63日齡和70日齡處理
6、組Ⅱ圖譜復(fù)雜,優(yōu)勢(shì)譜帶、圖譜相似性均趨向穩(wěn)定。序列分析表明,條帶A14與同源性最高的未培養(yǎng)微生物的相似性僅僅只有77%,與之親緣關(guān)系最近的已經(jīng)鑒定的微生物同源性也分別為77%,因此這個(gè)條帶可能代表新物種?;厥諟y(cè)序16個(gè)條帶,其中相似性在100%的有2條,相似性99%的有7條,其中已經(jīng)鑒定的有5條,分別為A2(Escherichiacoli)、A3(Lactobacillusvaginalis)、A5(Lactobacillusacido
7、philus)、A7(Clostridiumperfringens)、A15(Enterobactersp)。斷奶后家兔優(yōu)勢(shì)菌群主要為雙歧桿菌和優(yōu)桿菌為主,70日齡家兔主要為芽孢桿菌、擬桿菌屬,均屬于專性厭氧菌。條帶A1、A2、A10、A13、A16屬于厭氧菌、不可培養(yǎng)菌。條帶A8與已鑒定的saccharomycetes相似性僅為95%,說明A3可能是saceharomyeetes的新種。條帶A1為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組仔兔42日齡盲腸的共有
8、條帶,說明仔兔斷奶后一個(gè)星期條帶A2為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的優(yōu)勢(shì)菌群,條帶A6為各組仔兔49日齡仔兔共有條帶,為各組的優(yōu)勢(shì)菌群,條帶A7為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組仔兔49日齡盲腸的共有條帶,又為各組優(yōu)勢(shì)菌群,條帶A10為各組仔兔56日齡仔兔共有條帶,為各組的優(yōu)勢(shì)菌群,條帶A12為各組仔兔63日齡仔兔共有條帶,為各組的優(yōu)勢(shì)菌群,條帶A15為各組仔兔70日齡仔兔共有條帶,為各組的優(yōu)勢(shì)菌群。
綜上所述,不同DgF/ADF水平日糧對(duì)35~70日齡新西
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