鈣依賴蛋白激酶和腺苷酸環(huán)化酶參與擬南芥響應(yīng)大麗輪枝菌毒素誘導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程的實驗證據(jù).pdf

1、本研究首先觀察到黃萎菌毒素對擬南芥種子萌發(fā)和幼苗生長均有明顯的抑制作用，另外用針刺接種方法處理擬南芥葉片能產(chǎn)生典型的過敏性壞死病斑，說明毒素具有外源激發(fā)子的作用。在5種濃度的毒素篩選梯度培養(yǎng)基上對CDPK-CRK基因家族26個T-DNA插入純合突變體株系進行了篩選，發(fā)現(xiàn)CPK18的兩個不同突變體株系(cpk18A和cpk18B)與野生型有明顯差異，表現(xiàn)為對毒素處理更為敏感。對CPK18恢復(fù)突變和過表達植株的表型分析表明，恢復(fù)突變轉(zhuǎn)基因植

2、株對毒素的敏感性與野生型相同，而CPK18的過量表達使植株提高了對毒素的耐受性。這些結(jié)果表明擬南芥CPK18可能作為鈣信使的下游蛋白參與了植物響應(yīng)毒素誘導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。對防衛(wèi)反應(yīng)標記基因PR1的Northern檢測表明，毒素處理后CPK18 T-DNA插入突變體中PR1基因的轉(zhuǎn)錄在時間上遲于野生型，而過表達植株中PR1基因的轉(zhuǎn)錄則早于野生型，并且過表達植株中PR1轉(zhuǎn)錄量也顯著高于野生型。 本實驗室前期工作利用擬南芥和黃萎病菌毒

3、素研究模型證明了cAMP信使通過調(diào)控下游SA信號而進一步傳遞毒素誘導(dǎo)的信息。為深入研究cAMP的調(diào)控作用，本研究首先對擬南芥中編碼腺苷環(huán)化酶(AC)基因AC189和AC388的T-DNA插入純合突變體的表型進行了觀測。結(jié)果表明，在毒素處理條件下，AC189和AC388的突變體均對毒素較野生型更為敏感，突變體幼苗在正常生長狀況下內(nèi)源cAMP含量也明顯低于野生型。據(jù)此推測突變體對毒素敏感的表型可能是由于AC189和AC388被敲除、內(nèi)源cA