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1、目的:利用滅多威作用于家蠅胚胎細(xì)胞系(MDEC-07114),探討滅多威誘導(dǎo)MDEC-07114細(xì)胞凋亡及機(jī)制。
方法:1、實(shí)驗(yàn)分組:不同濃度滅多威組(1mg/ml組、2mg/ml組、4mg/ml組、8mg/ml組),同時(shí)設(shè)正常組、1%丙酮組;2、HE染色法觀察MDEC-07114細(xì)胞凋亡形態(tài),并測(cè)定細(xì)胞凋亡指數(shù);3、TUNEL檢測(cè)MDEC-07114細(xì)胞凋亡;4、透射電鏡觀察不同濃度滅多威作用后MDEC-07114細(xì)胞的
2、超微結(jié)構(gòu)變化;5、羅丹明標(biāo)記處理MDEC-07114細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位的變化。
結(jié)果:1、不同濃度滅多威作用于MDEC-07114后,從2mg/ml組開(kāi)始見(jiàn)典型凋亡細(xì)胞,細(xì)胞凋亡指數(shù)增加,且隨濃度的遞增而逐漸升高;2、TUNEL檢測(cè):2mg/ml組出現(xiàn)明顯的綠色熒光,4mg/ml組有所增加,8mg/ml熒光最強(qiáng);3、透射電鏡觀察:1mg/ml組開(kāi)始出現(xiàn)核染色質(zhì)濃縮、邊集。從2mg/ml組開(kāi)始出現(xiàn)典型凋亡細(xì)
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