celecoxib誘導(dǎo)肝癌細胞凋亡及其相關(guān)分子機制的實驗研究.pdf

1、南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文celecoxib誘導(dǎo)肝癌細胞凋亡及其相關(guān)分子機制的實驗研究姓名：劉寧波申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理學(xué)指導(dǎo)教師：冷靜20040420南京醫(yī)科尢學(xué)碩士學(xué)位論文胞株為celecoxib體外作用的模型，按常規(guī)方法培養(yǎng)。2應(yīng)用原位雜交技術(shù)檢測三種肝癌細胞株中COX一2mRNA表達；WesternBlot方法檢測COX一2蛋白表達水平；免疫細胞化學(xué)實驗對COX一2蛋白袁這透行定位。3倒最顯微鏡和常規(guī)HE切片觀察celeco

2、xib對三種細胞株生長的影響。4，磁’玎法檢測celecoxib縫埋后紐胞增殖抑裁率戇變純。5免疫細胞化學(xué)檢測用藥前后PCNA表達和Akt(Thr308)磷酸化水平的改變。6流式細胞術(shù)和TUNEL荑驗檢測細胞凋亡指數(shù)。7WesternBlot實驗檢測用藥前后caspase9、caspase一3激活水平，Akt(Thr3黯)磷酸化水平的改變。8免疫細胞化學(xué)及TUNEL實驗結(jié)果使用LeicaRA2型圖像分析系統(tǒng)進行處理。研究結(jié)果：1艨位雜交

3、結(jié)暴顯示三葶孛野細胞癌細跑株中均可以檢測列COX一2mRNA表達，WesternBlot結(jié)果顯示三種肝細胞癌細胞株中均可以檢測到COX一2蚤盎的表達，免疫鰓跑化學(xué)結(jié)暴鼴示COX。2蛋白主要定位于細胞漿。2，倒顯顯微鏡下觀察，celecoxib呈劑量和時間性依賴性地抑制三種肝細胞癌細胞株的增殖，競鏡觀察，細胞蟲現(xiàn)凋亡現(xiàn)象，有凋亡小體形成。3。MTT法顯示celecoxib可明顯抑制三種肝細胞癌細胞株的增殖，這種抑制效應(yīng)在6259mol／L