辛硫磷和滅多威混配的生殖發(fā)育毒性作用研究.pdf

1、目的： 觀察辛硫磷(Phoxim,Pho)和滅多威(methomyl,Met)對大鼠生殖系統(tǒng)的聯(lián)合毒性作用及其發(fā)育毒性作用，為闡明其對人類健康的潛在危害提供實驗依據(jù)。 方法： （1）選擇健康成年雄性SD 大鼠24 只，按2×2 析因設計隨機分為4組：即Pho（1/50LD50，25.20 mg/kg Pho）、Met （1/50LD50，0.47mg/kg Met）、Pho+Met（25.20 mg/kg Pho

2、+0.47mg/kg Met）和陰性對照組（蒸餾水）。灌胃染毒每天一次，每周5d，連續(xù)染毒60d。測量大鼠體重增長量、臟器濕重；精子參數(shù)(精子計數(shù)、活率、畸形率)；血清和睪丸中氧化損傷指標(超氧化物歧化酶SOD、丙二醛MDA、谷胱甘肽S轉移酶GST、谷胱甘肽GSH)；睪丸標志酶(酸性磷酸酶ACP、乳酸脫氫酶LDH、ATP酶)；血清中雄性激素睪酮(T)；睪丸及附睪組織形態(tài)等的改變。 （2）選用性成熟健康雌性SD 大鼠24 只，隨機

3、分為辛硫磷組(1/50LD50，29.4mg/kgPho)、滅多威組(1/50LD50，0.34mg/kg Met)、辛硫磷+滅多威組(兩者1：1 混合)和陰性對照組(蒸餾水)，共4組，每組6 只。每天用受試物給大鼠灌胃1 次，每周灌胃5d，連續(xù)灌胃30d。采用陰道脫落細胞涂片法觀察大鼠動情周期的變化；放射免疫法測定血清雌二醇(E2)、孕酮(P4)水平；分光光度法測定其血清和卵巢超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽硫轉移酶(GST)的活力

4、以及丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量和血清中丁酰膽堿酯酶(BchE)的含量；并觀察子宮及卵巢組織形態(tài)等的改變。 （3）選擇成年健康SD 大鼠為受試對象，雄性大鼠36 只，雌性大鼠72 只，按體重隨機分為4組，每組18 只，即陰性對照組（蒸餾水）、辛硫染毒組（1/50LD50，29.4mg/kg）、滅多威染毒組（1/50LD50，0.34mg/kg）、辛硫磷+滅多威染毒組（Pho24.9+Met0.34mg/kg），雄雌

5、1：2 合籠交配，行陰道涂片檢查確定受孕后選取健康受孕SD 大鼠60 只，采用灌胃染毒方式，自受孕第2天(GD1)開始,灌胃染毒至分娩前一天結束。染毒期間結合孕鼠體重增長情況，以等體重法剔除未受孕雌鼠，使各組孕鼠數(shù)目一致。實驗采用2×2 析因設計。觀察記錄以下指標：孕鼠：①一般情況、分娩情況觀察；②孕鼠生產指標：妊娠期體重增長變化情況、妊娠天數(shù)、產仔數(shù)、活產數(shù)。仔鼠：①大體觀察；②內臟檢查；③仔鼠出生指標：出生體重、身長、尾長；④活產指

6、數(shù)；⑤外觀畸形率。⑥性成熟仔鼠精子數(shù)量、活率、畸形率、臟器系數(shù)和睪酮(T)。觀察混配農藥辛硫磷與滅多威對雌性大鼠妊娠結局及對仔鼠出生缺陷、生長發(fā)育的影響。 結果： （1）辛硫磷和滅多威混配對精子數(shù)量、活率、畸形率、和睪酮(T)存在協(xié)同作用；對血清中SOD和GSH、睪丸組織中SOD、GST、GSH和ACP、Na+K+- ATPase等存在拮抗作用；對其它指標尚未觀察到交互作用。辛硫磷和滅多威混配引起了睪丸組織的形態(tài)學變化主

7、要表現(xiàn)為生精小管管腔內可見脫落的各級生精細胞，部分生精小管生精細胞層數(shù)和各級生精細胞數(shù)量均減少，細胞排列疏松紊亂，管腔內成熟精子數(shù)量減少，附睪未見明顯組織病理學變化。 （2）在本試驗劑量水平下(1/50 LD50) 滅多威對使大鼠動情期延長、E2濃度升高、P4含量下降，其差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。辛硫磷組、滅多威組檢測結果與陰性對照組比較：其血清SOD、GST、GSH 水平升高、MDA 含量下降；卵巢SOD、GST、

8、GSH 水平下降、MDA 含量升高(P<0.05 或P<0.01)。辛硫磷+滅多威混配組與陰性對照組比較：血清SOD、GST、GSH 水平升高，血清MDA、P4 含量降低；卵巢SOD、GST，GSH 水平降低，表現(xiàn)為拮抗作用。辛硫磷和滅多威混配組大鼠卵巢的形態(tài)未見明顯改變，其子宮出現(xiàn)腺體數(shù)目增多以及部分腺體擴張的改變。 （3）在本試驗劑量水平下(1/50LD50)，辛硫磷、滅多威使孕鼠活產數(shù)、仔鼠出生體重、身長、尾長、活產指數(shù)降

9、低，外觀畸形率升高，差異有顯著性(P<0.05 或P<0.01)。辛硫磷+滅多威混配使仔鼠外觀畸形率增高，有交互作用，可能為協(xié)同作用，畸形特征主要為大頭、短肢、短尾；對仔鼠出生體重、身長、尾長具有交互作用，其機制有待進一步研究;對性成熟仔鼠精子活率、畸形率和睪酮(T)具有交互作用，對其它指標尚未觀察到交互作用。 結論： 辛硫磷和滅多威混配染毒對雄性大鼠生殖系統(tǒng)存在聯(lián)合毒性作用。精子數(shù)量、活率、畸形率和血清睪酮具有協(xié)同作用