過表達(dá)OsTCTP轉(zhuǎn)基因水稻汞抗性分析.pdf

1、水稻翻譯調(diào)控腫瘤蛋白(TCTP，translational controlled tumor protein)是真核生物體內(nèi)一種廣泛存在并且高度保守的蛋白。近年來，TCTP由于其能夠參與多種外界脅迫應(yīng)答的特點，受到越來越多研究者的關(guān)注。研究表明，當(dāng)植物遭受高溫、低溫、鹽等逆境脅迫時，TCTP基因在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上都明顯上調(diào)。本實驗室之前的水稻根蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，重金屬汞脅迫下，水稻根部TCTP蛋白表達(dá)量上調(diào)。本研究使用先前克隆得到的O

2、sTCTP基因片段，構(gòu)建OsTCTP過表達(dá)載體，在中花11中過表達(dá)，并對轉(zhuǎn)基因植株在汞脅迫下的應(yīng)答行為做了研究。
　　 對兩個獨立的OsTCTP過表達(dá)株系T5和T16的研究發(fā)現(xiàn)，正常條件下，OsTCTP過表達(dá)株系與野生型中花11沒有顯著差異，但在汞脅迫下表現(xiàn)出一系列表型和生理上的差異。將萌發(fā)種子置于O-50μM的HgCl2條件下生長2周，過表達(dá)株系較之中花11具有更強(qiáng)的汞耐受性，表現(xiàn)為汞脅迫下根、莖生長的下降程度較低，這種抗性在

3、根部比在地上部更為明顯。使用80μM的氯化汞處理五葉期水稻幼苗3天的過程中，SOD活性隨著處理時間的延長持續(xù)升高，過表達(dá)株系顯著高于中花11；GPX活性和游離脯氨酸含量呈現(xiàn)先升高后降低趨勢，過表達(dá)株系顯著高于中花11；MDA積累表現(xiàn)為先升高后降低趨勢，過表達(dá)株系顯著低于中花11。表型和生理實驗的數(shù)據(jù)顯示，過表達(dá)OsTCTP可以提高水稻幼苗的汞耐受性。OsTCTP通過提高水稻的抗氧化水平和游離脯氨酸濃度參與汞脅迫應(yīng)答，在這個過程中很可能還