超表達PtADC轉(zhuǎn)基因甜橙的抗性鑒定.pdf

1、生物和非生物脅迫嚴重制約了柑橘生產(chǎn),已有研究表明多胺在植物抗逆性中發(fā)揮重要作用,本實驗室在前期將枳中克隆的多胺合成相關(guān)基因PtADC轉(zhuǎn)入冰糖橙并獲得轉(zhuǎn)基因株系,但對其抗性未加以分析。本研究以517、533和576三個轉(zhuǎn)基因株系和未轉(zhuǎn)化植株(WT)為材料,對其生物與非生物逆境抗性進行了評估,主要研究結(jié)果如下:
　　 1.內(nèi)源多胺含量和表達分析:通過HPLC檢測多胺含量可知,三個轉(zhuǎn)基因株系的腐胺、亞精胺含量和多胺總量高于WT,并且腐

2、胺在多胺總量中所占的比例和亞精胺在多胺總量中所占的比例都高于WT,但精胺含量和變化趨勢不明顯。
　　 2.潰瘍病抗性分析:對轉(zhuǎn)基因株系和WT進行潰瘍病菌接種,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系感病時間延遲,發(fā)病率低于未轉(zhuǎn)化系,表明冰糖橙轉(zhuǎn)基因植株對潰瘍病抗性增強。
　　 3.氧化脅迫抗性分析:用濃度為2％(v/v)H2O2處理葉圓片,發(fā)現(xiàn)在處理12h后,WT葉圓片邊緣開始有明顯的白化現(xiàn)象,36h后基本完全白化；而轉(zhuǎn)基因株系的葉圓片在處理12

3、h后才開始出現(xiàn)漂白癥狀,處理36h后,整個葉圓片也沒有完全白化,仍然較綠。葉綠素含量分析表明,處理后轉(zhuǎn)基因株系葉圓片葉綠素含量顯著高于WT。進一步采用2001μmol/L甲基紫精(MV)處理葉圓片,發(fā)現(xiàn)處理48h后,轉(zhuǎn)基因系持綠能力仍然高于WT；分析葉綠素含量,仍然是前者葉綠素含量更高。上述結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因株系抗氧化脅迫能力得到增強。
　　 4.抗氧化酶活性分析:SOD、POD、CAT活性分析表明,三個轉(zhuǎn)基因系的抗氧化酶的活性要