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文檔簡介
1、目的:建立軟骨發(fā)育模型,運用基因芯片檢測軟骨發(fā)育過程的基因表達譜,探討軟骨發(fā)育相關基因的功能和相互作用關系,為軟骨發(fā)生(形成)機制的闡明奠定基礎,為軟骨組織工程提供實驗依據(jù)。
方法:建立小鼠胚胎肢芽發(fā)育模型,觀察軟骨發(fā)生的全過程;采用基因芯片技術進行大規(guī)模、高通量的基因表達譜分析;運用生物信息學分析技術篩選軟骨發(fā)生的相關基因;利用體內(nèi)、體外建模、基因轉(zhuǎn)染和分子生物學技術等對基因芯片檢測結(jié)果進行驗證。
結(jié)果:成
2、功建立了小鼠胚胎肢芽軟骨發(fā)育模型,運用Affymetrix mouse 430 2.0全基因組芯片檢測包括軟骨發(fā)育基因在內(nèi)的小鼠全部45000個基因,檢測出的發(fā)育各期的差異表達基因數(shù)均在2998個,運用聚類分析和表達趨勢分析方法從中篩選出17個基因表達組群的表達趨勢,其中包括有99個既往研究顯示與軟骨及骨發(fā)育相關的熱點基因,同時有已經(jīng)命名但功能尚未探明的基因107個,尚未命名的未知轉(zhuǎn)錄本890個。
結(jié)論:軟骨發(fā)育的關鍵時期
3、應該在E10(間質(zhì)干細胞)~E14(軟骨)階段。軟骨的發(fā)育是一個涉及多種酶活性調(diào)節(jié)、生長分化調(diào)節(jié)因子,與組織架構(gòu)密切相關的細胞骨架、細胞凋亡(Apoptosis),以及細胞周期(Cell cycle)、RNA 轉(zhuǎn)錄、DNA復制等多個類別和基因族的復雜調(diào)控過程。這一復雜的調(diào)控網(wǎng)絡既包括目前研究結(jié)果所關注的已知與軟骨發(fā)育相關的基因,也包括許多功能尚未清楚甚至尚未命名的轉(zhuǎn)錄本,同時與血管、肌肉、神經(jīng)等多種組織器官的發(fā)育存在著復雜的相關交差和關
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