模擬空間環(huán)境誘變溫莪術內生真菌及代謝產物生物活性研究.pdf

1、目的:
　　 模擬空間微重力、高磁場環(huán)境對溫莪術內生真菌EZG0807進行誘變,篩選出抗生活性更高的正突變株。研究比較突變株與出發(fā)菌株EZG0807的菌體形態(tài)、細胞生長及其代謝產物的抗生活性。
　　 方法:
　　 采用稀釋涂布平板法對誘變得到的菌株進行分離純化;通過濾紙片擴散法和MTT法分別研究誘變株代謝產物對大腸桿菌、普通變形桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌的抗菌活性和抗乳腺癌細胞MCF-7的活性,篩選出正突

2、變株;將得到的正突變株與出發(fā)菌株EZG0807通過肉眼和顯微觀察法比較兩者的菌落、菌絲及孢子形態(tài);十字交叉法測量菌落直徑和干重法測定生長曲線比較兩者的生長速度;通過濾紙片擴散法抑菌實驗和MTT抗腫瘤實驗比較其抑菌及抗腫瘤細胞活性。
　　 結果:
　　 1.溫莪術內生真菌EZG0807經模擬空間環(huán)境誘變后共分離得到129株菌,其中24h,0g條件下得到15株菌;24h,1g14株;24h,2g16株;48h,0g17株;4

3、8h,1g6株;48h,2g22株;72h,0g13株;72h,1g14株;72h,2g12株;
　　 2.濾紙片擴散法初篩結果顯示,129株菌中17株菌的代謝產物對金黃色葡萄球菌、普通變形桿菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌有較好的抑制作用;
　　 3.MTT法復篩結果表明:初篩的17株菌中誘變菌722-6的代謝產物對MCF.7細胞的抑制率比出發(fā)菌株EZG0807高58.08％;
　　 4.菌落形態(tài)上,正突變株722-

4、6的菌絲較出發(fā)菌株EZG0807纖長,膨松,且菌絲呈直立狀,基內顏色偏暗;兩株菌的菌絲及孢子形態(tài)相似,第4天時出發(fā)菌株EZG0807在光學顯微鏡下觀察到孢子囊,而正突變株菌722-6沒有;
　　 5.通過比較菌落直徑大小和生長曲線發(fā)現(xiàn):正突變株722-6在PDA培養(yǎng)基上的菌落生長速度比出發(fā)菌株EZG0807慢,在查氏液體培養(yǎng)基中的生長速度也較慢,但進入穩(wěn)定期后,兩株菌的菌體干重基本相同;
　　 6.在生物活性方面,正突變