模擬空間誘變菌株銅綠假單胞菌代謝產(chǎn)物活性的研究.pdf

1、鼠李糖脂是銅綠假單胞菌代謝產(chǎn)生的新型表面活性劑，不僅能乳化、增溶、降低表面活性，還具有抗菌抗腫瘤的功效。但鼠李糖脂產(chǎn)量低，成本高昂，限制其進(jìn)一步研究。選育鼠李糖脂高產(chǎn)菌株及開發(fā)利用發(fā)酵液中的其他有效成份成為降低鼠李糖脂生產(chǎn)成本的有效辦法。本實(shí)驗(yàn)通過模擬空間誘變選育出鼠李糖脂高產(chǎn)銅綠假單胞菌，然后進(jìn)行大量發(fā)酵，研究其代謝產(chǎn)物各組分的活性。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.將實(shí)驗(yàn)室保藏菌種N1207通過微生物形態(tài)學(xué)、生理生化及16SrD

2、NA進(jìn)行鑒定。該細(xì)菌為革蘭氏陰性桿狀細(xì)菌;進(jìn)化關(guān)系分析表明該菌與銅綠假單胞菌S164S的同源關(guān)系最近。由此判斷該菌為銅綠假單胞菌，命名為PseudomonasaeruginosaN1207。將該菌進(jìn)行模擬空間誘變，篩選出鼠李糖脂高產(chǎn)菌株M14808。
　　 2.通過搖瓶法及發(fā)酵罐法對銅綠假單胞菌M14808進(jìn)行大量發(fā)酵，將發(fā)酵液分離提純，得五種代謝產(chǎn)物，分別為黃色、藍(lán)色色素，脂肽，單、雙鼠李糖脂。以雙鼠李糖脂為陽性對照，對代謝產(chǎn)

3、物的生物活性進(jìn)行檢測。抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，脂肽對革蘭氏陰性、革蘭氏陽性、真菌均具有一定的抑制效果?？鼓[瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，藍(lán)色色素作用于細(xì)胞HepG2的IC50濃度最低，為15.67±0.13μg/mL。脂肽作用于細(xì)胞A549的IC50最低，為82.039±2.06μg/mL。
　　 3.實(shí)驗(yàn)篩選出誘變株M14808的代謝產(chǎn)物藍(lán)色色素及脂肽。通過質(zhì)譜、傅里葉紅外對藍(lán)色色素和脂肽進(jìn)行鑒定，判斷藍(lán)色色素為綠膿菌素，脂肽分子中含有飽和碳鏈及